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人非小细胞肺癌细胞；NCI-H524图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人非小细胞肺癌细胞；NCI-H524图片
形态特性  圆形
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞1982年建系，源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
传代方法 
传代情况 P21
冻存条件  基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：12；D16S539：12；D18S51：12，13；D19S433：16；D21S11：29，30；D2S1338：16，17；D3S1358：15；D5S818：12；D7S820：11，12；D8S1179：13，15；FGA：21，22，25；TH01：8，9.3；TPOX：8，10；vWA：14，17；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 40000100g
81211-250Western 印迹膜洗膜液250mL
130699-3000RNase 抑制剂 ( 小鼠源 )3000U
牛血清白蛋白5g
Calcein Blue 250mg
非冻型血液 DNA 保存液100mL
茜素红 S 染色试剂盒100mL
18-0620-100一氧化氮检测试剂盒 ( 化学法 )100 T
100808-1溴化乙锭干粉 (EB)1g
神经氨酸酶检测试剂盒100 次
DNA 快速连接试剂盒100 次
BCA 法蛋白定量试剂盒500 次
克必隆 eTS miRNA cDNA 文库构建试剂盒1套
130645-808- 氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶80U
100921-25地高标记 dUTP 溶液25μLPhenylmethylsulfonyl fluoride基磺酰329-98-6
2-Methyl-3-buten-2-ol2-基-3-丁-2-醇115-18-4
2-Thioxanthine2-硫代黄嘌呤2487-40-3
Sodium octyl sulfate基硫酸142-31-4
Panaxadiol人参二醇19666-76-3
1-BUTYLPYRIDINIUM HEXAFLUOROPHOSPHATEN-丁基吡啶六磷酸186088-50-6
Desoxycholate Lactos去氧胆酸琼脂
4-CHLORO-2-FLUOROIODOBENZENE4--2--1-碘6797-79-1
NA对基阱
POLY(ETHYLENE GLYCOL SUCCINATE)聚（1,4-丁二醇丁二酸）酯25569-53-3
2-DI-TERT-BUTYLPHOSPHINO-2',4',6'-TRIISOPROPYLBIPHENYL2 - 二叔丁基膦-2'，4'，6' -三异丙基联564483-19-8
Tin tetrachloride四化锡7646-78-8
1,1,1,2-TETRACHLOROETHANE1,1,1,2-四乙烷630-20-6
5-CHLORO-2-METHOXYBENZONITRILE5--2-氧基55877-79-7
Di-tert-butyl dicarbonate二碳酸二叔丁酯24424-99-5
3,3'-Dimethoxybenzidine dihydrochloride联大茴香胺酸20325-40-0
Carnosic acid鼠尾草酸3650--09-7
4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucopyranoside4-基伞形-β-D-葡糖苷18997-57-4
3,4-Difluoronitrobenzene3,4-二基369-34-6
2'-Deoxycytidine-5'-triphosphoric acid disodium salt三磷酸脱氧胞苷102783-51-7
DI-T-BUTYLPHOSPHINE二叔丁基膦819-19-2
NA鸟粪硫酸
Amstat氨环酸1197-18-8
Simvastatin伐他汀79902-63-9
2,5-Dimethylphenol2,5-二基酚95-87-4
Taq 酶抗体250U
碘化丙啶苯10mg
胰酶消化液 ( 含 EDTA)100mL
双荧光素酶报告基因检测试剂盒100 次
131022-0.5链霉亲和素，AP 标记0.5mL
101005-100即用型易错 PCR 试剂盒100 次
兔抗鸡 IgY，辣根过氧化物酶标记300μL