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人胚胎，皮肤，肌肉；M-20价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

人胚胎，皮肤，肌肉；M-20价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性   
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

蛋白酶 K 干粉    100mg
蛋白酶 K 溶液，10mg/mL    1.5mL
蛋白酶抑制剂混合液    2×0.5mL
蛋白去除试剂 M    5 g 
蛋白去除试剂 S    3g 
蛋白折叠试剂盒    100 次
蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)    20 次
蛋白质电泳分子量标准 (3.3-20.1KD)    15 次
蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0KD)    10 次
刀豆蛋白 A IV    25mg
刀豆球蛋白 A Ⅲ    50mg
等离子体胺氧化酶    600U
低 pH 缓冲液套装    30 次Bacterial Protein Extraction Reagent, EZLysEZLys Bacterial Protein Extraction Reagent
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDaDiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa
20-HETE Lipid Maps MS Standard (500 ug)2-hydroxy Arachidonic Acid, 20-HETE Lipid Maps MS Standard, 2-hydroxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid
-+)-2,5-epi Goniothalesdiol (25 mg)-+)-2,5-epi Goniothalesdiol, methyl 3-(3S,4S-dihydroxy-5S-phenyltetrahydrofuran-2R-yl)propanoate
8-iso Prostaglandin A2 (50 mg)8-epi PGA2, 8-iso Prostaglandin A2, 9-oxo-15S-hydroxy-(8.beta.)-prosta-5Z,1,13E-trien-1-oic acid
Metformin (1 g)Biguanide|Cidophage|DMGG|Glucofine, Metformin, N,N-dimethyl-imidodicarbonimidic diamide
5-cis Carbaprostacyclin (10 mg)(5Z)-6a-Carbaprostaglandin I2, 5-cis Carbaprostacyclin, 6,9.alpha.-methylene-11.alpha.,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
PtdIns-(3,4)-P2 (1,2-dipalmitoyl) (sodium salt) (5 mg)Phosphatidylinositol-3,4-diphosphate C-16|DPPI-3,4-P2, PtdIns-(3,4)-P2, 1-(1,2R-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt
(R)-(+)-Eicosapentaenyl-1 -Hydroxy-2 -Propylamide (5 mg)(R)-(+)-Eicosapentaenyl-1 -Hydroxy-2 -Propylamide, N-((R)-1-hydroxypropan-2-yl)icosa-5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-pentaenamide
柠檬酸氢二铵（500GM）Ammonium Citrate， Dibasic， CAS# 3012-65-5； MW 226.19； ACS Reagent
七水硫酸亚铁（500GM）Ferrous Sulfate， 7H2O， CAS# 7782-63-0； ≥99.5%
一水氯化锰（500GM）Manganese Sulfate， H2O， CAS# 10034-96-5； ≥98%
二水钼酸钠（1KG）Sodium Molybdate（VI）， Dihydrate， CAS# 10102-40-6； MW 241.95； ACS
L-苏氨酸（25GM）L-Threonine， CAS# 72-19-5； MW 119.12； USP
派诺宁Y 超纯级Pyronin Y UltraPure grade
低熔点琼脂糖    2.5g
低熔点琼脂糖    5g
低载量 PCR 片段纯化试剂盒    100 次
低载量 PCR 片段纯化试剂盒    50 次
地高标记 dUTP 溶液    25μL
地塞米松    100mg
地塞米松溶液 ,50mg/mL    1mL