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HAKATA胎牛血清暑期*

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内毒素检测

内毒素，又叫脂多糖（LPS）或脂寡糖（LOS），存在于革兰氏阴性菌的细胞外膜。临床上，内毒素作为一些革兰氏阴性菌的诊断提示，如脑膜炎球菌。动物体内，内毒素能够导致发热或者诱导炎症反应；细胞培养中，内毒素能够诱导细胞反应异常。

通常，采用鲎阿米巴样细胞裂解实验（LAL检测）检测内毒素水平。LAL是从美洲鲎（见图一）的血液中制备的，对内毒素非常灵敏，在微量内毒素存在情况下就凝结。阿米巴样细胞相当于哺乳动物的白细胞。

特异性血清及其加工方式

热钝化

胎牛血清的常规处理方式是热钝化，即放在56°水浴30分钟；其目的是使血清中的补体成分及一些未知的细胞生长抑制分子失活。

与胎牛血清的其它加工方式一样，热钝化处理过程必须小心谨慎，因为血清中的生长因子容易在较高温度或者较长时间加热条件下失活，甚至产生沉淀。

Life Technologies公司的Invitrogen及HAKATA品牌的热钝化胎牛血清用在细胞培养中，来研究UCP-2及UCP-3 [3] ，核因子kappa-B [4] ，蚕杆状病毒表达系统中表达FMDV衣壳蛋白 [5] ，亚临床的移植物抗宿主病 [6] ，IFN-gamma的作用 [7] ，及自噬 [8] 。Thermo Fisher HyClone公司的热钝化胎牛血清用来研究能引起严重急性呼吸综合征的冠状病毒的核衣壳蛋白 [9] ，NO [10] ，激活素C [11] ，及IE1 [12] 。Sigma公司的热钝化胎牛血清用来研究化疗 [13] ，而Equitech-Bio公司的热钝化胎牛血清用来研究谷胱甘肽巯基转移酶Pi [14] 。

活性炭处理

活性炭能够结合脂溶性分子，因此能够用来除去激素类物质，例如，胎牛血清中的雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮及T3和T4分子。血清中这些脂类激素能够干扰免疫检测及胰岛素检测方法。

Thermo Scientific的活性炭吸附的胎牛血清（csFCS）被用来识别TGF-beta家族成员 [15] 。

透析处理

透析处理能够除去胎牛血清中所有分子量小于10,000Da的分子。例如，激素、细胞因子、葡萄糖、氨基酸还有许多其它分子，都能够被除去。透析也能除去胎牛血清中的抗生素及其它内源分子。

Life Technologies的透析处理的胎牛血清被用来研究驱动蛋白5B [16] 及丙酮酸激酶M2失活 [17] ，Thermo Fisher HyClone的透析处理胎牛血清用来研究KRAS信号通路的突变 [18] ，而Sigma公司的透析处理胎牛血清用来研究PAH代谢情况 [19] 。

gamma照射

Gamma照射能够对胎牛血清进行灭菌处理。胎牛血清常规的灭菌方法是多次透过0.1um的滤膜以消除微生物污染，而gamma照射能够钝化牛群中常见的病毒。但是，一些类型的病毒能够抵抗gamma照射，比如细小病毒。

低IgG含量

低IgG的胎牛血清适用于抗体生产及相关领域。

图 2. HAKATA Life Technologies许可。

干细胞培养

与一般细胞培养相比，干细胞培养对生长因子有更严格的要求。由于胎牛血清中的一些生长因子促进干细胞分化，所以，需要检测各批胎牛血清在保持不同类型干细胞的性方面的性能。

来源地

胎牛血清的主要来源地就是那些大量养牛的国家，包括美国、澳大利亚、新西兰、加拿大及南美和中美洲地区，由政府机构管理血清制品的生产及收集过程。

胎牛血清分为美国农业部（USDA）级和欧盟级。其中，美国农业部级胎牛血清没有疯牛病（BSE）及口蹄疫（FMD）污染，能够出口到任何国家，而欧盟级胎牛血清只在大部分欧洲国家及亚洲国家销售。

如何保存胎牛血清？

胎牛血清一般是在-5°到-20°之间冻存，2°到8°之间融化。一个比较好的办法是，将胎牛血清分装到50ml管中，这样做就避免了反复冻融对血清造成的危害。血清融化后常出现沉淀，可能是血清蛋白变性造成的。简短离心即可除去沉淀，并且，这些沉淀一般不会影响血清质量的。

胎牛血清的选择

许多供应商提供不同等级、不同来源及不同处理的胎牛血清。而胎牛血清是一种复杂的混合物，不同供应商的不同批次产品肯定会有一些不同。因此，有必要建立一套选择、评估胎牛血清的机制。

一般来说，可以通过参考相关研究文献选择适合的胎牛血清。

Labome对212篇科研文献做了关于胎牛血清使用情况的调查。