蒂科(上海)生物科技有限公司

A549/Taxol细胞-A549/Taxol耐药株生长状态

时间:2017-4-12阅读:1398
编号:MXC027                        
细胞株名称:A549/Taxol人肺癌紫杉醇耐药株
种属:人
组织来源:肺癌
生长特性:贴壁生长
形态特征:上皮细胞
微生物及支原体检测:阴性
安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。
培养条件:
 
 
 
*培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+200ng/ml Taxol
血清我们推荐用:
HAKATAFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
培养条件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%
传代方法:
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加*培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。
注:观察细胞在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们。..
 
冻存方法:  冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO
  储存:液氮储存

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