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YPD Agar Medium 酵母

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所在地西安市

更新时间:2021-02-05 09:31:28浏览次数:102次

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纯度 99 供货周期 现货
规格 应用领域 化工,生物产业
主要用途 科研
YPD Agar Medium 酵母
在酵母双杂交系统中,“诱饵"蛋白X克隆至DNA-BD载体中,表达DNA-BD/X融合蛋白;待测试蛋白Y克隆至AD载体中,表达AD/Y融合蛋白。一旦X与Y蛋白间有相互作用,则DNA-BD和AD也随之被牵拉靠近,恢复行使功能,报告重组体中LacZ和HIS3基因的表达

YPD Agar Medium 酵母

 英文名:YPD Agar Medium

描述:YPD系列培养基属于Rich medium,也可以称为*培养基。YPD Medium 由精选的蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖按适当比例混合组成;YPDA培养基是在YPD培养基中添加了适量的硫酸腺嘌呤。YPD AgarYPDA Agar分别在YPDYPDA基础上加入了Agar,作为固体培养基倒板用。YPD系列培养基用于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的常规培养。

 

使用方法:

Rich Liquid Media (Broth)  

  • 50克的YPD或者YPDA1升的去离子水中溶解。  

2. pH 值在6.0±0.2范围内,调整pH121℃高压15分钟。  

3. 避光、室温条件下储存培养基。  

Rich Plating Media with Agar  

  • 70克的YPD Agar或者YPDA Agar1升的去离子水中溶解(琼脂在高压后才能溶解)。
  • pH 值在6.0±0.2范围内,调整pH121℃高压15分钟。  
  • 冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

为什么我做的平板不凝?  

自行添加Agar,务必选用AgarCA1331),添加量为20 g/L。固体培养基不凝固可能是由于pH值偏低或者时间过长(也会降低pH值);水质偏酸也会使得培养基偏酸,建议前调整YPD系列培养基的pH6.5121℃,高压15min,及时从锅内取出培养基。

 双杂交系统的建立得力于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转录因子的参与。80年代的工作表明, 转录因子在结构上是组件式的(modular), 即这些因子往往由两个或两个以上相互的结构域构成,其中有DNA结合结构域(DNA binding domain,简称为BD)和转录结构域(activation domain,简称为AD),它们是转录因子发挥功能所的。单独的BD虽然能和启动子结合,但是不能转录。而不同转录因子的BD和AD形成的杂合蛋白仍然具有正常的转录的功能。如酵母细胞的Gal4蛋白的BD与大肠杆菌的一个酸性结构域B42融合得到的杂合蛋白仍然可结合到Gal4结合位点并转录。

在酵母双杂交系统中,“诱饵”蛋白X克隆至DNA-BD载体中,表达DNA-BD/X融合蛋白;待测试蛋白Y克隆至AD载体中,表达AD/Y融合蛋白。一旦X与Y蛋白间有相互作用,则DNA-BD和AD也随之被牵拉靠近,恢复行使功能,报告重组体中LacZ和HIS3基因的表达

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yyp2021.2.3

 

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