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非变性蛋白上样缓冲液(5×,无还原剂)是一种用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)的蛋白样品上样缓冲液。
以下是对该缓冲液的详细介绍:
一、产品特点
非变性:该缓冲液不含变性剂,如SDS等,因此不会破坏蛋白质的天然构象,适用于需要保持蛋白质活性的电泳实验。
无还原剂:该缓冲液中不含DTT、β-巯基乙醇等还原性试剂,因此不会还原蛋白质中的二硫键,有利于保持蛋白质的原始结构。
高浓度:该缓冲液为5倍浓缩,方便使用且减少储存空间。
二、产品规格
常见的非变性蛋白上样缓冲液(5×,无还原剂)规格有2mL、5mL、10mL等,
三、产品组成
非变性蛋白上样缓冲液(5×,无还原剂)通常包含以下成分:
溴酚蓝:作为电泳示踪剂,帮助观察蛋白质在电泳过程中的迁移情况。
缓冲剂:如Tris-HCl等,用于维持电泳过程中的pH值稳定。
甘油:增加溶液的粘度,有助于蛋白质在电泳胶中的分离。
四、使用方法
溶解:在室温或不超过37℃的水浴中溶解非变性蛋白上样缓冲液,水浴溶解后立即室温存放,避免长时间置于水浴中。
混合:按照一定比例(如每4μL蛋白样品加入1μL 5×非变性蛋白上样缓冲液)混合蛋白样品和缓冲液。
上样:将混合后的溶液直接上样到PAGE胶加样孔内。
电泳:进行电泳直至蓝色染料到达胶的底端附近时停止电泳。
五、注意事项
储存条件:非变性蛋白上样缓冲液(5×,无还原剂)应储存在4℃或-20℃的环境中,避免高温和光照。
使用安全:使用时应佩戴一次性手套等防护用品,避免皮肤直接接触和吸入。
适用性:该缓冲液仅适用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验,不适用于变性电泳实验。
仅供科研实验用,不做其他用途!
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