详细介绍
做ELISA的经验总结: 1、包被原的性质很重要,蛋白浓度,是否降解,这关系到你做出的抗体可不可以被其识别,所以保存抗原很重要,做重组蛋白时,一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。2、加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。在批放行前,每一批酶联免疫试剂都完成37℃热稳定性试验,试验结果符合产品的质量标准,以保证产品的安全性、有效性及质量可控。