一站式全血mRNAOUT 返回列表页

一站式全血mRNAOUT产品及特点
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA，mRNA只占总RNA的1%左右，但由于带poly(A)尾巴，所以可以通过与Oligo(dT) 纤维素的亲和结合而与其他RNA（如rRNA、tRNA等）分离开。本产品专门用于从全血中一站式提取mRNA，其操作流程如下：
具有下列特点：
1. 一站式，是由天恩泽的高效、血液RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整合而成，即开即用，非常方便。
2. 一次可以处理0.5-1.5 mL的全血，能得到约2-3 μg总RNA，其中1-5%为mRNA。
3. 提供的Oligo(dT)纤维素吸附能力强，每克可以吸附50-80 OD的mRNA，相当于2000-3000 μ g mRNA。
4. mRNA提取过程操作简单，只需要离心就可以完成，免去了常规的灌柱、洗柱等繁琐操作，样品也不会被稀释。
5. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果
*步，用血液RNAOUT的方法提取全血总RNA，zui后用50μL洗脱，将两管收集在一起，共得到100μL总RNA（详见柱式血液RNAOUT的使用手册）。
第二步，从总RNA中纯化mRNA：将0.5 mL 溶液A（结合液）加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中，放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A，转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中，颠倒混匀数次，离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A，混匀后4℃ 200g 离心5分钟，小心弃上清。重复上步洗3-5次，用RNase-free水洗脱mRNA。
第三步，如果需要浓缩，可用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA（详见微量核酸沉淀剂使用手册）。
注：所得mRNA只占总RNA的5%左右，很微量很珍贵，一般不宜电泳检测。