一、术前准备

1. 动物选择：健康SD大鼠，雄性，6-8周龄，体重180-250g。

2. 麻醉：常用麻醉剂包括异氟烷吸入麻醉、戊ba比妥钠（40 mg/kg腹腔注射）或10%水合氯醛（0.3-0.4 ml/100g腹腔注射）。

3. 备皮与消毒：剃除左后肢或右后肢毛发，碘酒和75%乙醇消毒手术区域。

二、手术操作

1. 暴露坐骨神经：沿股骨长轴偏后侧切开约1 cm皮肤，钝性分离肌肉，暴露坐骨神经主干。

2. 神经结扎：

• 使用4-0铬制羊肠线或丝线，在坐骨神经主干上均匀结扎4道，间隔1 mm。

• 结扎松紧度：以引起后肢肌肉轻微颤动为宜，避免wan全阻断神经血供。

3. 假手术对照：仅暴露神经而不结扎。

三、术后处理

1. 缝合与消毒：逐层缝合肌肉和皮肤，术后注射青霉素（10万U/d，连续4天）预防感染。

2. 恢复观察：单笼饲养，观察步态异常、足背触地、肌肉wei缩等疼痛表现。

四、模型验证

1. 行为学检测：

• 机械痛阈（MWT） ：使用Von Frey纤维丝测定缩足反应阈值，术后4-7天阈值显著降低表明模型成功。

• 热痛阈（TWL） ：通过热板试验或辐射热刺激测量缩足潜伏期，潜伏期缩短提示痛觉过敏。

2. 病理与分子指标：

• 坐骨神经水肿、空泡变性及炎性细胞浸润。

• 血清IL-1β、TNF-α等炎性因子升高，脊髓内cGAS/STING通路激活。

五、注意事项

1. 结扎一致性：松紧度需严格控制，避免过度结扎导致神经wan全损伤。

2. 操作规范：文献报道因操作失误可能导致动物死亡，需由经验丰富人员操作。

3. 模型局限性：CCI模型疼痛反应约持续2个月，10-14天达高峰，相比SNL模型更易操作但稳定性稍差。