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胶原诱导小鼠关节炎模型构建
胶原诱导小鼠关节炎模型构建
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  • 所在地 上海市

更新时间:2025-05-09 16:55:00浏览次数:1312

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【简单介绍】
胶原诱导小鼠关节炎模型构建:上海申知心致力于临床前药效学CRO实验,多年的胶原诱导小鼠关节炎 CIA模型的构建,为实验提供保障。可开展胶原诱导小鼠关节炎 CIA模型的构建。
【详细说明】

一、传统CIA模型构建步骤(基于II型胶原蛋白)

  1. 材料准备

    • II型胶原蛋白:溶解于醋酸(如5 mg胶原溶于10 mM醋酸,4℃过夜溶解)

    • 佐剂:与wan全弗氏佐剂(CFA)等体积混合,冰浴超声乳化(2000 Hz),形成乳白色乳化液(现用现配)

  2. 免疫注射

    • shou次免疫:皮下注射乳化液至小鼠尾根部远端(剂量100 μl/只,含200 μg胶原),注射后观察局部反应

    • 加强免疫:shou次免疫后第21天,于原注射部位近端再次注射等量乳化液

  3. 模型评估

    • 临床症状:shou次免疫后约27天出现爪部发红,35天左右出现严重肿胀、关节僵硬(评分标准:0-4分,根据肿胀程度分级)

    • 病理检测:通过HE染色观察滑膜增生、炎性细胞浸润、软骨破坏等,或通过X光、MRI评估骨质侵蚀



4. 适用品系

  • 敏感品系包括DBA/1、B10.RIII等,建议使用7-8周龄小鼠

二、胶原抗体诱导模型(CAIA)的优化方法

  1. 原理与优势

    • 直接注射抗II型胶原单克隆抗体合剂(如A2-10、F10-21等),联合低剂量LPS(脂多糖),绕过自身抗体生成,快速诱导关节炎(3-5天发病)

    • 优点

  • 适用于CIA不敏感品系(如C57BL/6、BALB/c)及基因敲除小鼠

  • 发病率接近100%,病理特征与人类RA高度相似

  1. 操作要点

    • 抗体与LPS剂量:低剂量抗体合剂(如5-克隆抗体)联合LPS注射,减少不良反应

    • 评估:HE染色显示滑膜增生、炎性细胞浸润及软骨破坏(图2示例)

三、注意事项与对比

  1. 品系选择

    • CIA依赖MHC单倍型(如DBA/1),而CAIA适用于更广品系(包括T/B细胞缺陷小鼠)

  2. 模型差异

    • 周期:CIA需35天以上,CAIA仅需数天至2周

    • 成本:CAIA试剂(单克隆抗体)成本较高

  3. 伦理与操作规范

    • 需遵守动物福利,定期监测体重和活动能力,避免过度应激

四、总结

  • CIA模型:适合研究自身免疫反应,模拟RA慢性病程,但周期长、品系限制多

  • CAIA模型:适用于快速筛选抗炎药物或基因研究,尤其对C57BL/6等品系效果xian著


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