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上海申知心生物科技有限公司
主营产品： 高血脂症动物模型,心血管疾病动物模型,缺血性心脏病动物模型 |
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2015-5-5 阅读(2070)
| 提 供 商 | 上海申知心生物科技有限公司 | 资料大小 | 22.5KB |
|---|---|---|---|
| 资料图片 | 下载次数 | 466次 | |
| 资料类型 | WORD 文档 | 浏览次数 | 2070次 |
免疫荧光组化操作流程 (石蜡切片)
1、3μm石蜡切片贴在涂有切片粘合剂的干净载玻片上,57℃烤4-18h;
2、石蜡切片常规脱蜡至水，0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
3、抗原修复:0.02mol/L pH6.0 CB(柠檬酸盐缓冲液),微波98℃(Ⅲ档)15min,自然冷却20min;0.4%胃蛋白酶消化40min,at
37℃ ；
4、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
5、加一抗PGP9.5 1:100； 37℃温孵2h,
6、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
7、加二抗（FITC标记） 1:200室温温孵2h;
8、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
9.蒸馏水洗3min,
10、DAP-I和封片增强剂（Sigma公司）封片;-20℃保存待共聚焦观察。
