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蔗糖磷酸化酶(SP)生化检测试剂盒

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更新时间:2023/11/05 19:40:13浏览次数:379

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产品简介

供货周期 现货 规格 100管/96样 50管/48样
货号 EY-01S125 应用领域 生物产业
主要用途 仅用于科研
蔗糖磷酸化酶(SP)生化检测试剂盒SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解糖苷键,催化糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相应的糖基低聚糖。此外,SP还能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。

详细介绍

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产品名称:蔗糖磷酸化酶(SP)生化检测试剂盒

规格:100/96 50/48 

货号 : EY-01S125

测试方法:微量法 紫外分光光度法  

分类:辅酶系列

10.png

测定意义SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解糖苷键,催化糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相应的糖基低聚糖。此外,SP还能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。测定原理SP能够以磷酸为受体,催化蔗糖产生1-磷酸糖,在糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸糖,在6-磷酸糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率,即可计算SP活性。自备实验用品及仪器天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿和蒸馏水。

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试剂一:液体×1瓶,室温保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。              

试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。临用前加入22mL试剂二,现配现用。

试剂四:液体×1支,4℃保存。

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1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。

3、血清等液体:直接测定。

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(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T

=1608×△A÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:25℃中每104个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=1608×△A ÷细胞数量13.png

(4)按液体体积计算

活性单位定义:25℃中每毫升血清每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V样÷T

=1608×△A

ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V反总:反应体系总体积,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1 mL;T:反应时间,1min。

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