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上海一研生物科技有限公司

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亮发光杆菌如何分离鉴定?

阅读:675      发布时间:2017-10-13
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【方法】利用亮发光杆菌富集培养基分离喜树种子内生放线菌,并根据菌落形态及 16S rRNA 基因序列同源性分析进行菌种鉴定;以及利用与病原微生物共培养方法检测分离菌株的抗菌活性。

【结果】从上海交通大学校园的喜树种子中共分离到 33株内生疑似放线菌,经基于 16S rRNA基因序列分析的分子鉴定,确定其中 21 株属于链霉菌,1 株属于拟诺卡氏菌,另有 3 株由于序列相似性低于 95%而无法分类;8 株因未能克隆 16S rRNA 基因序列而未确定分类。这 11 株疑似内生放线菌是否是新放线菌(种)类群,有待后续深入研究。初步的抗细菌、真菌活性检测发现,分离到的内生放线菌中 42.42%以上对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)有很强的抑制菌核形成的作用,54.54%内生菌有较强抑制芽孢杆菌生长的作用。并且挑选其中具有代表性的菌株 Streptomyces sp. CXSZ1 进行代谢产物的分析,初步发现其代谢产物中含有抗细菌活性成分。

【结论】喜树种子内生放线菌的分离、鉴定及生物活性物质分离鉴定的研究工作,一方面可以为揭示喜树等高等植物种子内生菌的起源、演化等提供有价值的信息,同时也为新结构、新活性化合物发掘提供实验材料。

植物内生菌长期生活于某种植物内部,因其*的生存环境,可能进化出与宿主植物类似的代谢途径与产物。近年来,植物内生菌作为一种新的微生物资源,而成为天然产物发掘的热点,并成功筛选到了紫杉醇、鬼臼毒素、长春碱等化合物产生菌。获得特定生物活性物质产生菌,不仅为环保、可持续天然产物,及实现规模化提供了有利条件;同时,也为复杂天然产物生物合成途径理论研究提供了更好的实验材料。

喜树为我国*珙桐科高大乔木,其次生代谢产物中的喜树碱(Camptothecin,CPT)通过作用于拓扑异构酶 I (Topo I),而诱导细胞凋亡。喜树碱及其衍生物已被广泛应用于肝癌、胃癌、膀胱癌及白血病等的临床治疗。迄今对于喜树内生菌的研究主要集中在内生亮发光杆菌,并且已经发现了能够产喜树碱的内生真菌;对喜树的根、茎、叶等器官中的内生放线菌已有研究,但对喜树种子内生放线菌的研究尚未见报道。
中药对照药材    TLC法鉴别    121070-200503    知母        0.5g
中药对照药材    TLC法鉴别    121071-200502    狗脊        5.0g
中药对照药材    TLC法鉴别    121072-200505    枸杞子        0.5g
中药对照药材    TLC法鉴别    121073-9901    胡黄连        1.0g
中药对照药材    TLC法鉴别    121074-200402    莱菔子        1.0g
中药对照药材    TLC法鉴别    121075-200402    桑寄生        5.0g
中药对照药材    TLC法鉴别    121076-9901    救必应        4.0g
中药对照药材    TLC法鉴别    121077-9901    积雪草        1.5g
中药对照药材    TLC法鉴别    121078-200402    五倍子        1.0g
亮发光杆菌

 

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