费氏弧菌发光杆菌菌种程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。其中母种的分离选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制作则相对比较简单。下面介绍各级菌种的制作技术。

母种的分离选育方法是：母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。

1.采集种源。费氏弧菌发光杆菌从野生或人工栽培群体中选择有代表性的优良菇体作为种源。①种菇选择时间。一般在11月上中旬，在*批和第二批菇中挑选。因为这段时间蘑菇生长正是旺盛时期，菌丝生活力强，子实体健壮，质量好，加之气温适宜，蘑菇能正常成熟。②种菇的标准是：八成熟，朵形圆正，肉质肥厚，颜色洁白，无病虫害。采集一二朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。从栽培室采集的应标有原菌株代号。

2.培养基配制。琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200克、琼脂16～18克、葡萄糖20克、水1000毫升。先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸15～30分钟至薯块酥而不烂为止。煮后用6～8层事先浸湿拧干的纱布过滤，过滤后加入琼脂16～18克（气温低时加16克，气温高时加18克）再煮，并不断搅拌，使固体琼脂*溶化，再用4～6层纱布过滤。将滤液加水至1000毫升加入20克葡萄糖，搅拌溶化趁热分装试管。装入量为试管高度的1/4～1/5，注意培养基不要粘着试管口，管口用棉塞塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，每瓶装量为20毫升。然后置于高压锅内，在压力达108千帕，锅内温度为121℃灭菌30分钟左右。灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，费氏弧菌发光杆菌冷却后即成为固体斜面培养基。