青海发光杆菌的分离提取
1.变性与等电点选择性沉淀：取新鲜蛋清用1%NaCl-0.05mol/LHCl 溶液搅拌稀释，加20%HAc 调至pH4.6，3000r/min 离心10min，收集滤液并记录体积，留样2mL(Ⅰ)待分析。将滤液置于沸水浴使3min 内迅速升温至75℃，用流动水速冷后，3000r/min 离心20min，收集上清液，纪录体积，并留样2mL(Ⅱ)待分析。
2.丙烯酸处理：将所得清液(pH6.0左右)中滴加10%聚丙烯酸(用量为清液体积的1/4)，慢速搅拌，当凝聚物出现后，静置30min 使凝聚物粘附于容器底部。倾去上清液，加入蒸馏水约1mL，并滴加少量0.5mol/LNa2CO3，使沉淀溶解，此时溶液pH6左右。搅拌条件下向溶液中滴加500g/LCaCl2(体积为聚丙烯酸量的1/12.5)，生成的沉淀挤压干后弃去。如所得溶液不够澄清，可以进行离心或简单过滤，并用少量水洗涤滤纸。收集滤液于刻度试管，记录体积，留样0.5mL(Ⅲ)待分析。
3.Sephadex G-50 柱层析
(1)装柱：称取15g Sephadex G-50，加入300mL 蒸馏水溶胀6小时以上，置热水浴中加热除去气泡，冷却后装入玻璃层析柱。用6g/LNaCl 溶液200mL 平衡层析柱。
(2)上样：向样液中加入固体NaCl 使终浓度为50g/L，上样时先吸去层析柱凝胶面上的溶液，再沿管壁滴加样品，样品量不宜超过10mL。加完后打开层析柱出口，让样品均匀流入凝胶内。
(3)洗脱：样品流完后，先分次加入少量6g/LNaCl 洗脱液洗下柱壁上的样品，然后接通蠕动泵，继续6g/LNaCl 洗脱，调节操作压力使流速控制在7~8mL/10min，部分收集器收集，10min 一管，共收集200mL 左右。
(4)分析：纪录各管体积，紫外光吸收法测定各管中蛋白质浓度。合并含有蛋白质的收集管，草酸鉴定Ca2+ ，留样(Ⅳ)待分析。
4.乙二醇浓缩：青海发光杆菌将洗脱液放入透析袋，外面裹以聚乙二醇，置于加盖容器中。当酶液水分被聚乙二醇吸收而浓缩至5mL 左右时，用蒸馏水洗去透析膜外的聚乙二醇，倒出浓缩液，记录体积，留样0.5mL(Ⅴ)待分析。
250克    Anaerobic Broth    用于专性厌氧菌培养    GAM肉汤
250    Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar    用于致病性弧菌的选择性分离（GB、SN标准）    TCBS琼脂    
250    EEM medium    用于致病性大肠杆菌的增菌培养和肠杆菌的增菌培养(Japan方法)    EEM培养基
250克    Dextrose Semisolid Medium    用于志贺氏菌的生化试验    葡萄糖半固体发酵管
250    Ammonium Dextrose Medium    用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验（GB标准）    葡萄糖铵培养基  
250    Dextrose Semisolid Medium    用于志贺氏菌的复合生化试验（GB标准）    葡萄糖半固体培养基   
250克    MS Medium    用于植物组织培养的基础培养基    MS培养基
青海发光杆菌