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当前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR-染料法>> 50次猴病毒40 PCR试剂盒
| 供货周期 | 一周 | 规格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 货号 | XY-0673 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 |
猴病毒40 PCR试剂盒
Simian Virus 40(SV40)
产品及特点
SV40 是猴病毒 40（Simian Virus 40）的缩写，其基因组是一种环形双 链的 DNA，基因组 5.2kb。SV40 在体外可使人及动物多种组织类型的正常细 胞发生恶性转化，在转基因小鼠体内可诱发多种肿瘤形成，并且人类许多肿瘤 的发生也与之有关。SV40 和 BK 病毒（BKV，BK Virus）、JK 病毒（JKV， JK Virus）等病毒的生物学特性各不相同，但由于新生的小鼠、大鼠、仓鼠、 家兔、豚鼠等对这些病毒都特别敏感，多个部位或器官会发生肉瘤或癌症，故 又通称多瘤病毒(Polyoma Virus)。本产品就是专门用于检测 SV40 的高灵敏 荧光定量 PCR 检测方法，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增 SV40 病毒，与其他病毒没有交叉 反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
猴病毒40 PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（亮黄盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（蓝色） |
试剂三 | SV40 病毒PCR 引物混合 液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | SV40 病毒PCR 阳性对照 | 50 μL（黄盖）
|
| 试剂五 | 天净沙核酸释放剂试用装 | 20 次（1 mL，绿盖） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
SV40 病毒PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2个样品DNA模板 | 各18 μL | - | - |
PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
PCR 阳性对照（SV40 病 毒 PCR 阳 性 对 照 的 10000 倍稀释液） | - | - | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 （35个循环） | 95℃ | 15 sec |
60℃ | 60 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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