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当前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR-染料法>> 50次HIV-1前病毒PCR试剂盒
| 供货周期 | 一周 | 规格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 货号 | XY-0379 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 |
HIV-1前病毒PCR试剂盒
HIV-1 Provirus HIV-1
产品及特点
人类免疫缺陷病毒１型（HIV-１）患者血浆中病毒 RNA 水平一直以来是评判抗病 毒治疗效果或预测疾病进展的重要指标。但是，经抗病毒治疗后血浆 HIV-１RNA 已达 到基线水平感染者的血液、精液或淋巴结中仍可以检测到 HIV-１原病毒 DNA 的存在， 构成病毒储藏库，对清除 HIV-１病毒构成严重阻碍。所以在病毒载量已经检测不到的 情况下，HIV-１原病毒 DNA 水平可以作为除 CD4+Ｔ细胞计数和病毒载量之外的另一 标志物。本产品就是针对此需求而建立的一种检测 HIV-１原病毒 DNA 的 PCR 检测方 法，该种方法还可用于 HIV-１病毒储藏库中 HIV-１原病毒 DNA 的检测。本试剂盒具 有下列特点： 
1. 根据 HIV-1 LTR 基因设计的针对 HIV-1 原病毒的 PCR 引物，专一性强。
2. 即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
3. 试剂盒有阳性对照，别于区分真假阳性。
4. 本试剂盒足够 50 次 40μL 反应体系的常规 PCR。
5. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
HIV-1前病毒PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | 2×PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（本色盖） |
试剂三 | HIV-1 前病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | HIV-1 前病毒 PCR 阳性对照 | 50 μL（黄盖）
|
| 试剂五 | 天净沙DNA释放剂试用装 | 50次（试用装） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此 作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
HIV-1 前病毒 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品（包括 PC 和 NC） | 各18 μL | - | - |
超纯水 | - | 18 μL | - |
PCR 阳性对照 10000 倍稀释液 | - | - | 18 μL |
4. 按下列 PCR 参数进行 PCR 扩增：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 （35个循环） | 94℃ | 30 秒 |
53℃ | 30 秒 | |
72℃ | 45 秒 | |
后延伸 | 72℃ | 10 分钟 |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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