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当前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR-染料法>> 50次球孢白僵菌PCR试剂盒
| 供货周期 | 一周 | 规格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 货号 | XY-0116 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 |
球孢白僵菌PCR试剂盒
Beauveria bassiana
产品及特点
球孢白僵菌（Beauveria bassiana）属于子囊菌门、肉座菌目、虫草菌科、 白僵菌属，是广谱性昆虫病原真菌，主要进行无性繁殖，产生分生孢子;可进 行有性生殖并产生子实体，被鉴定为球孢虫草。球孢白僵菌在世界范围被用 于害虫生物防治，其中我国使用球孢白僵菌防治马尾松毛虫和玉米螟是 上大的害虫防治项目，取得良好的害虫持续控制效果。球孢白僵菌也能感 染家蚕等经济昆虫，感染家蚕幼虫干燥后的尸体称为僵蚕。入药能祛风、镇 惊等。由于加强防治，近年来白僵菌对家蚕的感染大为减少，为解决僵蚕的 药源问题，以蚕蛹为原料，接入白僵菌，所得蚕蛹可代僵蚕用。本产品是根 据 PCR 原理开发的球孢白僵菌检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩球孢白僵菌，与其他病原没有交叉反 应。。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
球孢白僵菌PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
试剂三 | 球孢白僵菌PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 球孢白僵菌PCR阳性对照 （1×10E8拷贝/μL） | 50 μL（黄盖））
|
试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 蜡状芽孢杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | PCR 阳性 对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
球孢白僵菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照（水） |
| 18 μL |
|
PCR阳性对照（球孢白僵菌PCR阳性对照的10000倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 （35个循环） | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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