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当前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR-染料法>> 50次对虾杆状病毒PCR试剂盒
| 供货周期 | 一周 | 规格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 货号 | XY-0111 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 |
对虾杆状病毒PCR试剂盒
Baculovirus Penaei(BP)
产品及特点
对虾杆状病毒(Baculovirus Penaei)是一种能在细胞核内产生金字塔状的包涵体的病毒，会引起对虾的肝胰腺或中肠上皮细胞核内由于感染多角体杆状病毒而引起的多种对虾的急性传染病。除了死亡特征外，受BP感染的虾也表现为摄饵减少，生长速度降低，虾体表面因附生或共栖生物增多而出现烂鳃或细菌的混合感染等非特定症状，对野生对虾资源有巨大危害，因此快速检测对虾杆状病毒具有重要意义。本产品具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增对虾杆状病毒，与其他病毒没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
对虾杆状病毒PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（亮黄盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（蓝色） |
试剂三 | 对虾杆状病毒PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 对虾杆状病毒PCR阳性对照 （1×10E8拷贝/μL） | 50 μL（黄盖））
|
试剂五 |
天净沙核酸释放剂 |
50次（9 mL） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 蜡状芽孢杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | PCR 阳性 对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
对虾杆状病毒PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照（水） |
| 18 μL |
|
PCR阳性对照（对虾杆状病毒PCR阳性对照的10000倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 （35个循环） | 95℃ | 45 sec |
54℃ | 45 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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