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供货周期 | 一周 | 规格 | 50T |
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货号 | XY-0100 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 |
地衣形芽孢杆菌PCR试剂盒
Bacillus licheniformis
产品及特点
地衣芽孢杆菌细胞形态和排列呈杆状、单生,可调整菌群失调达到治疗目的, 可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。能产生抗活性物质,并具有* 的生物夺氧作用机制,能抑制致病菌的生长繁殖。因此对地衣形芽孢杆菌进行 快速灵敏的诊断具有重要的意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的产 品,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供细菌 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增地衣形芽孢杆菌。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。
地衣形芽孢杆菌PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄盖) |
试剂三 | 地衣形芽孢杆菌PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 地衣形芽孢杆菌 PCR 阳性对照(1 ×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖))
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试剂五 | 天净沙核酸释放剂(试用装) | 20 次(1 mL,绿 盖) |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 100 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以 此作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌 DNA 提取试 剂盒兼容。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | PCR 阳性 对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
地衣形芽孢杆菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照(水) |
| 18 μL |
|
PCR 阳性对照(地衣形芽孢杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液) | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 (35个循环) | 95℃ | 15 sec |
58℃ | 15 sec | |
72℃ | 60 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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