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当您的ELISA试剂盒实验出现负值

时间:2017-9-5阅读:2664
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当您的ELISA试剂盒实验出现负值

ELISA试剂盒实验假如按上诉方法处理后查看仍有负值,则处理数据时可以选用2个方法:这即是在咱们的说明书中主张查看血清时做1:2稀释的要素。
标准曲线只取标准曲线的下面4~5个点,即125,62.5,31.25,15.625,7.8,0,或62.5,31.25,15.625,7.8、3.9、0。
除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀释外,其它一些细胞因子都要做1:2稀释(这在咱们的说明书中有提示)。
做法是:先在样本孔中加50ul试剂稀释液(试剂盒中已备),再加50ul样本。
ELISA试剂盒人为的把“0”pg/ml点OD值降低。原则是把“0”OD值降到比zui低的样本OD略低一点,尽可能使样本的含量满是正值,一同确保改动“0”OD值后的标准曲线的相关系数(r)>0.98。
求出样本含量后需求乘上稀释倍数2。
原则是把样本的OD值全包括,标准曲线又能至少有4个点。也即是把标准曲线的下端(即样本含量会合的这一段)拓宽,求出的数据更可靠。
这么改动后,一般样本都能得到数据,低的样本出来了,高的样本含量也会高一些。
因为核算时是相对含量的比照,所以不会影响ELISA试剂盒实验核算效果。
ELISA试剂盒血清中有些细胞因子的检出率很低,血清中又富含很多大分子杂蛋白,在血清浓度较高时简略隐秘抗原的表位,因此在测血清原液经常出现负值。

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