贴壁细胞标准换液步骤

贴壁细胞标准换液步骤

一、准备工作
1.  废液缸
2.  吸管
3.  新鲜培养基
4.  油性记号笔/普通签字笔
5.  实验记录本

二、实验步骤
1.  打开层流，打开层流间和超净台的紫外线灯，废液缸和吸管同时照射；
2.  把水浴锅调整到37℃ 并使其稳定；
3.  将新鲜培养基放置到水浴锅中，注意防止水面高于瓶肩，100ml液体保持10分钟，（200ml液体保持15分钟，500ml液体保持20分钟），间或摇动；
4.  着无菌服装，帽子，口罩和手套
5.  用75%乙醇消毒培养基瓶外壁，放置到超净台上；
6.  将细胞培养瓶取出，用75%乙醇棉球消毒瓶底；
7.  用吸管吸弃旧培养基，更换吸管，于非细胞培养面加入新鲜培养基；
8.  记录实验过程和细胞培养瓶号。