小鼠脑啡肽（ENK）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

小鼠脑啡肽(ENK)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
18 ng/L - 650 ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中脑啡肽(ENK)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脑啡肽(ENK)水平。用纯化的小鼠脑啡肽
(ENK)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脑啡肽(ENK)，再与
HRP 标记的脑啡肽(ENK)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底
物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脑啡肽(ENK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD
值），通过标准曲线计算样品中小鼠脑啡肽(ENK)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（1200ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
600 ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
300 ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
150 ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
75ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
37.5 ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽