大肠杆菌检测板

1 原理及适用范围：

大肠杆菌（E. coli）为埃希氏菌属（Escherichia）代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。大肠杆菌检测板含有选择性培养基、大肠杆菌特异性酶的显色指示剂和高分子吸水凝胶，运用微生物检测板专有技术，做成一次性快速检验产品。本产品适合于食品及原料中大肠杆菌的计数，如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测，也可用于表面的卫生检测。

执行标准：中华人民共和国国家标准《食品安全国家标准 食品微生物学检验  大肠杆菌计数》（GB 4789.38）。

2 大肠杆菌检测板操作方法

2.1 样品处理：取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲液（或生理盐水）的取样罐或均质袋内，制成1:10的样品匀液，根据样品污染程度及检验需要，可进一步制成10倍递增的样品稀释液。

2.2 接种：一般食品选2～3个适宜的稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌检测板置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1 mL样品匀液滴加到检测板内，迅速贴好上层膜并水平晃动检测板，让样品匀液均匀吸附在滤纸上，静置10 s左右，待样品匀液*被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两片。做好空白阴性对照。

2.3 培养： 将检测板叠在一起，倒置放于培养箱内。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。

3 大肠杆菌检测板结果判读

培养后纸片上的蓝色菌落为大肠杆菌，选择菌落数适中（15～150CFU）的纸片进行计数。两个检测板的平均菌落数乘以稀释倍数即为每克（或每毫升）样品中的大肠杆菌菌落行程单位数。如果所有的稀释度检测板上的菌落数都小于15CFU，则计数稀释度zui低的检测板上的平均菌落数乘以稀释倍数报告；如果所有的稀释度的检测板上均无菌落生长，则以小于1乘以zui低稀释倍数报告；如果zui高稀释倍数大于150CFU的检测板时，可计数一半或者1/4，然后再乘以2或者4，即为检测板上估算的菌落数。报告单位以CFU/g（或CFU/mL）表示。

4 附加说明

4.1大肠杆菌检测板不但可以大大缩短检测时间，而且检测结果与传统方法很接近，符合率可达90％左右。

4.2如果样品的酸碱度pH 7.0以下时，应先用灭过菌的碱性溶液（如1 mol/L NaOH）调节到pH6.5～7.5。

4.3注意使用过的检测板上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。