α2-MG试剂盒借双抗夹心 ELISA 技术定量测样本 α2-MG。各环节严控,按说明处理样本、规范操作,避光显色,精准助创伤、炎症及肿瘤诊疗。
α2-MG试剂盒
α2-MG试剂盒,即 α2 - 巨球蛋白(α2-Macroglobulin,α2-MG)试剂盒,专为体外精准定量检测生物样本中 α2-MG 的含量而设计。α2-MG 是一种由肝脏合成的大分子糖蛋白,在人体生理和病理过程中扮演着极为重要的角色。
在正常生理状态下,α2-MG 作为一种广谱蛋白酶抑制剂,能与多种蛋白水解酶如胰蛋/白酶、纤溶酶、胶原酶等结合,形成不可逆的复合物,有效调控蛋白酶的活性,维持体内蛋白酶与蛋白酶抑制剂之间的动态平衡,保障组织细胞的正常结构和功能。当机体遭遇创伤、炎症、感染以及肿瘤等病理情况时,α2-MG 的含量会发生显著变化。在创伤和炎症反应中,体内炎症介质释放,刺激肝脏合成 α2-MG 增加,其升高水平与创伤程度、炎症反应的剧烈程度相关,可作为评估病情严重程度和监测治疗效果的重要指标。例如在严重烧伤患者中,随着烧伤面积增大和感染风险增加,血液中 α2-MG 含量会急剧上升,通过检测 α2-MG 水平,医生能及时了解患者炎症状态,调整治疗方案。在肿瘤领域,α2-MG 与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关。部分肿瘤细胞可分泌某些因子影响 α2-MG 的表达和功能,一方面肿瘤细胞可能利用 α2-MG 抑制机体免疫细胞的活性,逃避免疫监视;另一方面 α2-MG 水平的变化也能反映肿瘤的发展进程,有助于肿瘤的早期诊断和预后评估。
该试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)技术。其核心部件是预包被有抗人 α2-MG 单克隆抗体的微孔板。当加入血清、血浆、细胞培养上清等生物样本后,样本中的 α2-MG 会特异性地与包被抗体结合。结合反应完成后,通过精心设计的洗板步骤,能够有效去除未结合的杂质,为后续检测营造纯净环境。随后,加入酶标抗人 α2-MG 抗体,它会与已结合在包被抗体上的 α2-MG 进一步结合,形成稳定的抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。再次进行洗板操作,彻di清除未结合的酶标抗体,接着加入底物 A 和底物 B 启动显色反应。在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下,底物发生反应,颜色逐渐显现,且颜色的深浅与样本中 α2-MG 的含量呈正相关。使用者借助酶标仪在特定波长下测定吸光度(OD 值),依据预先绘制好的标准曲线,即可精准计算出样本中 α2-MG 的浓度。
试剂盒组成科学合理,包含预包被微孔板、标准品、酶标抗体、底物 A、底物 B、终止液、浓缩洗涤液以及样本xi释液等。从原材料的严格筛选采购,到生产过程中的精细制作,再到成品的多轮严格检验,每一个环节都层层把关,确保为使用者提供质量稳定、结果准确的试剂盒。
在操作流程方面,首先要根据样本类型进行妥善处理。血清样本需自然凝固后离心取上清;血浆样本则需使用合适的抗凝剂处理后离心;细胞培养上清样本若有沉淀需先离心去除。接下来,合理设置标准品孔和样本孔,分别准确加入标准品和经过稀释的样本。将微孔板放入 37℃恒温箱中温育,使抗原抗体充分反应。温育结束后,进行洗板操作,这一步至关重要,务必保证洗涤充分,防止残留物质干扰实验结果。加入酶标抗体后再次温育,由于底物对光敏感,在加入底物进行显色时,必须在避光条件下操作。显色达到规定时间后,加入终止液终止反应,最后使用酶标仪读取 OD 值。值得注意的是,不同批次的试剂盒组分严禁混用,整个操作过程必须严格按照试剂盒说明书进行,以此保障检测结果的可靠性和准确性。