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NFKb ELISA 介绍
NF-κB ELISA，即核因子 κB 酶联免疫吸附测定，是一种用于定量检测生物样本中核因子 κB（NF-κB）含量的关键技术，在细胞信号传导研究、炎症相关疾病探索及肿瘤学等众多领域都有着不可huo缺的地位。
检测原理
NF-κB 试剂盒 主要运用双抗体夹心模式。试剂盒内的微孔板预先包被了针对 NF-κB 的特异性捕获抗体。当加入血清、血浆、细胞裂解液等待测样本时，样本中的 NF-κB 蛋白会与包被抗体特异性结合。随后添加酶标记的检测抗体，该抗体能与已结合在包被抗体上的 NF-κB 进一步结合，从而构建起 “捕获抗体 - NF-κB - 酶标检测抗体" 的稳定免疫复合物。接着加入酶的底物溶液，在酶的催化作用下，底物发生显色反应，颜色的深浅与样本中 NF-κB 的含量成正比。通过酶标仪在特定波长下测定吸光度（OD 值），再与预先绘制好的标准曲线相对照，便能精确计算出样本中 NF-κB 的含量。
操作流程
样本采集与处理：依据实验需求，收集适量样本。若是血清，需让血液自然凝固后离心获取；血浆则要在采血时添加合适抗凝剂再离心分离；细胞裂解液需按照规范流程裂解细胞并离心去除细胞碎片等杂质。收集处理好的样本妥善保存，防止反复冻融。
试剂盒准备：从冰箱取出试剂盒，室温（20℃ - 25℃）平衡 30 分钟，确保试剂盒内各试剂温度一致。同时准备好移液器、吸头、酶标仪等实验器材，并检查其性能是否正常。
加样：将标准品、待测样本及空白对照按规定体积准确加入微孔板相应孔中，轻轻振荡混匀，使样本与包被抗体充分接触，然后在设定温度下孵育特定时长。
洗板：孵育结束，弃去孔内液体，用洗涤液充分洗涤微孔板 3 - 5 次，彻di清除未结合的物质，降低非特异性信号干扰。每次洗涤后需将微孔板拍干，避免残留液体影响后续反应。
加酶标抗体：向各孔加入适量酶标检测抗体，振荡混匀后再次孵育。
显色与终止：加入底物显色液，在避光条件下孵育，待颜色变化至合适程度时，加入终止液终止反应，使反应停止在最佳检测状态。
结果测定：立即使用酶标仪在规定波长下测定各孔 OD 值，根据标准曲线计算出样本中 NF-κB 的含量。
性能优势与应用
高灵敏度：能够精准检测到极低浓度的 NF-κB，满足对微量样本或低表达水平的检测需求。
特异性强：试剂盒中的抗体对 NF-κB 具有高度特异性，与其他类似物质交叉反应极小，保证检测结果的准确性。
重复性好：同一批样本多次检测结果稳定，变异系数小，为科研及临床诊断提供可靠且可重复的数据支持。在应用方面，NF-κB试剂盒可用于研究炎症性疾病的发病机制、评估肿瘤的发展进程等，为医学研究和临床实践提供有力的数据支撑。