岛津：动物源性食品中四环素类兽药残留检测报告

方法一：依据GBT21317-2007
1. 前处理（以牛肉为例）
取已经匀浆好的牛肉5g（到0.01g），置于50ml 离心管中，加入50ul，10ppm 的混标，
保证每kg 肉中含1mg 标样。
分别加入20ml、20ml、10ml 0.1mol/L EDTA-Mallvaine 缓冲液冰水浴中超声10min 后取出，
3000r/min 下离心5min，合并上清液，定容至50ml，离心，取上清液，混匀，待净化。
Mallvaine 缓冲液配制：将500ml 0.1mol/L 柠檬酸溶液与312.5 ml 0.2mol/L 磷酸氢二纳溶液
混合，NaOH 溶液调节pH 值至4.0+/- 0.05
0.1mol/L EDTA-Mallvaine 缓冲液配制：称取30.25g 乙二胺四乙酸二钠放入812.5 ml Mallvaine
缓冲液中，使其溶解，混匀。
固相萃取小柱：
InertSep Pharma （3ml/60mg 或6ml/500mg）WondaSep HLB 3ml/60mg 均可
SPE 方法：
活化/平衡：5ml 甲醇、5ml 水
上样：50ml 待测液中准确取10ml 过柱
清洗：5ml 水、5ml 甲醇：水=1：19
小柱脱水干燥
洗脱：10ml 甲醇：乙酸乙酯=1：9
将洗脱液氮吹至干，用流动相定容至1ml，过滤，待测。
2. 色谱分析
色谱柱：InertSustain C18 5um 4.6*250mm
流动相：乙腈：甲醇：0.01%草酸溶液=2：1：7
流速：1.0ml/min
柱温：25℃
进样量：60 ul
检测波长：350nm
仪器：Shimadzu LC-20A

3. 实验结果
基质加标浓度为 1mg/kg，3 次平行实验结果如下：
名称          空白加标             基质加标
       回收率    回收率RSD     回收率   回收率RSD
土霉素 98.63%     7.5%         85.19%    2.2%
四环素 100.96%    8.4%         95.73%    5.8%
金霉素 91.05%     6.6%         98.11%    8.1%

......(具体情况基色普图参照附件)