线粒体分离和酶提取检测试剂盒

1、准确称取约0.1g 组织或收集约500万细胞，加入1mL试剂一和10uL试剂四，用冰浴匀浆器或研钵研磨。 2、4 ℃ 600 g 离心 5min。 3、弃沉淀，将上清液移另一离心管中，4 ℃ 11000 g 离心 10min。 4、上清液即胞浆提取物，可用于研究线粒体蛋白向胞浆的释放。 5、沉淀为完整线粒体。含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能。可用于线粒体的生理功能等方面的研究。 6、在沉淀中加入200uL试剂二和2uL试剂四，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），可用于线粒体酶活性测定。 7、在沉淀中加入200uL试剂三和2uL试剂四，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），可用于线粒体蛋白浓度测定。

线粒体分离和酶提取检测试剂盒

试剂一：50mL×1 瓶，-20℃保存；试剂二：10mL×1 瓶，-20℃保存；试剂三：10mL×1 瓶，-20℃保存；试剂四：1mL×1 支，-20℃保存；

1、分离线粒体和提取线粒体蛋白质的所有步骤均需在冰上或 4℃进行，所用溶液需冰浴或 4℃预冷。 2、通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取 600g 和 11,000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可以采用 1000g 和 3500g。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作