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化工,生物产业,制药/生物制药 |
Protein Kinase A ELISA KIT借双抗夹心法,精准测样本 PKA 含量。用于代谢、神经、肿瘤疾病研究,灵敏特异、操作简便,为多领域科研提供关键数据。
Protein Kinase A ELISA KIT
Protein Kinase A ELISA KIT是专门用于定量检测样本中蛋白激酶 A(PKA)含量的试剂盒。PKA 作为细胞内重要的信号转导分子,在调节细胞代谢、生长、分化、增殖以及基因表达等众多关键生理过程中扮演着核心角色,其功能异常与多种疾病的发生发展密切相关。
工作原理
该试剂盒主要依托酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,采用双抗体夹心法实现对 PKA 的精确检测。试剂盒内的微孔板表面预先牢固地包被有能够特异性识别 PKA 的抗体。当含有 PKA 的样本,如细胞裂解液(常见于各类细胞系,如肿瘤细胞、神经元细胞、内分泌细胞等)、组织匀浆(包括肝脏、心脏、骨骼肌、脑组织等多种组织)、血清或者血浆等加入到微孔板的反应孔中时,样本里的 PKA 会迅速且精准地与包被抗体结合,形成抗原 - 抗体复合物。随后,向反应体系中添加酶标记的另一种针对 PKA 不同抗原表位的抗体。这种酶标抗体能够特异性地识别并结合已经与包被抗体结合的 PKA,进而构建起稳定的 “包被抗体 - PKA - 酶标抗体" 免疫复合物结构。完成结合步骤后,通过多次严格的洗涤操作,将未参与特异性结合的多余试剂、杂质以及未结合的抗体等物质彻di清除,以此确保反应体系的纯净度和检测结果的准确性。最后,加入酶的特异性底物。此时,与免疫复合物相连的酶会对底物进行高效催化,引发底物发生化学反应,进而产生颜色变化。而颜色变化的程度,也就是颜色的深浅,与样本中 PKA 的实际含量呈正相关关系。借助专业的酶标仪精确测定反应孔的吸光度值,并将该值与试剂盒所提供的标准曲线进行仔细比对分析,就能够准确无误地计算出样本中 PKA 的浓度数值。
应用场景
代谢性疾病研究:在调节细胞糖代谢、脂代谢等过程中,PKA 起着关键作用。在糖尿病等代谢性疾病中,PKA 信号通路对胰岛素分泌、糖原合成与分解以及脂肪代谢等方面具有重要影响。通过检测相关组织(如胰岛 β 细胞、肝脏、骨骼肌、脂肪组织)中的 PKA 含量,有助于研究代谢性疾病的发病机制,评估疾病的进展情况,并为开发新的治疗药物和干预措施提供理论支持。例如,在 2 型糖尿病患者的胰岛 β 细胞中,PKA 活性和含量的改变可能影响胰岛素的正常分泌,通过检测 PKA 含量可深入探究其与疾病发生发展的关系。
神经系统疾病研究:在神经系统中,PKA 参与神经元的存活、神经递质的合成与释放、突触可塑性以及学习记忆等过程。在诸如阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病中,PKA 信号通路的异常与神经元的损伤和死亡相关。使用 Protein Kinase A ELISA KIT 检测患者或动物模型样本中的 PKA 含量,能够为揭示这些疾病的病理生理机制和开发有效的治疗策略提供线索。例如,在阿尔茨海默病患者的大脑组织中,PKA 的活性和含量变化可能影响 tau 蛋白的磷酸化,进而导致神经纤维缠结的形成,检测 PKA 含量有助于深入研究疾病的发病过程。
肿瘤研究领域:在肿瘤发生发展过程中,PKA 信号通路的异常激活或抑制与肿瘤细胞的增殖、存活、侵袭和转移密切相关。通过该试剂盒检测不同肿瘤组织或肿瘤细胞系中的 PKA 含量,有助于深入了解肿瘤细胞的生物学特性,寻找潜在的治疗靶点。例如,在乳腺癌、肺癌等多种实体瘤中,PKA 的表达水平与肿瘤的恶性程度、转移潜能以及患者预后相关。检测 PKA 含量可以为肿瘤的早期诊断、病情监测以及靶向治疗提供重要依据。