12
样本采集：采集适量人静脉血，室温静置待血液自然凝固后，离心分离获取血清样本。采血过程需严格遵循无菌操作规范，防止样本受到污染。采集后的血清样本若不能立即检测，应妥善保存于 - 20℃冰箱，避免反复冻融，以免影响抗体活性。
试剂盒准备：从冰箱取出试剂盒，在室温（20℃ - 25℃）下平衡 30 分钟，确保试剂盒内各试剂温度均匀。同时准备好移液器、吸头、酶标仪等实验器材，并检查其性能是否正常，保证检测过程顺利进行。
加样：将标准品（如有）、待测血清样本以及空白对照按规定体积准确加入微孔板相应孔中，轻轻振荡混匀，使样本与包被抗原充分接触，随后在设定温度下孵育一定时间，促进抗原抗体反应。
洗板：孵育结束后，弃去孔内液体，用洗涤液充分洗涤微孔板 3 - 5 次，彻di清除未结合的物质，降低非特异性信号干扰。每次洗涤后需将微孔板拍干，避免残留液体影响后续反应结果。
加酶标抗体：向各孔加入适量酶标抗人 IgM 抗体，振荡混匀后再次孵育，让酶标抗体与已结合的军团菌 IgM 抗体充分结合。
显色与终止：加入底物显色液，在避光条件下孵育，待颜色变化至合适程度时，加入终止液终止反应，使反应停止在最佳检测状态，便于准确读取结果。
结果判定：立即使用酶标仪在规定波长下测定各孔 OD 值。若样本 OD 值大于试剂盒给定的临界值，则判定为阳性，表明样本中存在军团菌 IgM 抗体；若样本 OD 值小于等于临界值，则判定为阴性，即样本中未检测到军团菌 IgM 抗体。对于具有定量功能的试剂盒，可根据标准曲线计算出样本中军团菌 IgM 抗体的具体含量。
高灵敏度：能够检测到极微量的军团菌 IgM 抗体，有助于在感染早期，抗体水平较低时，及时发现感染情况，为早期诊断提供有力支持。
特异性强：试剂盒中的抗原和酶标抗体具有高度特异性，与其他病原体抗体交叉反应极小，能准确识别军团菌 IgM 抗体，保证检测结果的准确性，减少误诊和漏诊情况的发生。
操作简便：整个检测流程相对标准化，操作步骤清晰明了，经过简单培训的人员即可熟练操作，适用于各级医疗机构和实验室开展检测工作。
结果稳定：在规定的保存条件下，试剂盒内各试剂性能稳定，多次检测同一批样本，结果重复性良好，为临床诊断和病情监测提供可靠的数据支持。