PAE-EGFR细胞，转EGFR受体的猪动脉内皮细胞_动物正常细胞-生物试剂销售中心

细胞系名称	中文名称	种属	安全等级	培养条件	细胞形态	生长状态
PAE-EGFR	转EGFR受体的猪动脉内皮细胞	猪	BSL-1	DMEM：F12(1:1) 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁

PAE-EGFR细胞，转EGFR受体的猪动脉内皮细胞 注意事项：

1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快。

2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

3、收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清. 刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。

4、收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。

6、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。

相关细胞株细胞系索引：

细胞系名称	中文名称	种属	*培养基	形态	生长方式
293T	SV40T转化的人胚肾细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
A431 [A-431]	人皮肤鳞癌细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
B16-F10	小鼠黑色素瘤高转移细胞	小鼠	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	黑色素细胞	贴壁
B82	小鼠肺成纤维细胞	小鼠	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	成纤维细胞	贴壁
B82-C1022	转EGFR受体突变体的小鼠肺成纤维细胞	小鼠	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	成纤维细胞	贴壁
DLD-1	人结直肠腺癌上皮细胞	人	RPMI-1640 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
DU145 [DU-145]	人前列腺癌细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
Hela	人宫颈癌细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
Hep G2	人肝癌细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
MCF7 [MCF-7]	人乳腺癌细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
MDCK	狗肾细胞	狗	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
MGH-U1	人膀胱癌細胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
NIH/3T3	小鼠胚胎成纤维细胞	小鼠	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	成纤维细胞	贴壁
P815	小鼠肥大细胞瘤细胞	小鼠	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%		半悬浮
PAE(porcine aorta endothelial cell，PAE cell)	猪动脉内皮细胞	猪	DMEM：F12(1:1) 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
PAE-EGFR	转EGFR受体的猪动脉内皮细胞	猪	DMEM：F12(1:1) 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
SW480 [SW-480]	人结肠癌细胞	人	DMEM高糖 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
SW620 [SW-620]	人结肠癌细胞	人	RPMI-1640 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
T24	人膀胱移行细胞癌细胞	人	McCoy 5A 90%，胎牛血清 10%	上皮细胞	贴壁
TM3	小鼠睾丸间质细胞	小鼠	DMEM：F12(1:1) 92.5%，马血清 5%；胎牛血清 2.5%	上皮细胞	贴壁
TM4	小鼠睾丸间质细胞	小鼠	DMEM：F12(1:1) 92.5%，马血清 5%；胎牛血清 2.5%	上皮细胞	贴壁

细胞培养培养基如下：！

*DMEM（高糖）培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500mL

空白DMEM（高糖）培养基（含1%双抗）500mL

*RPMI-1640培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500mL

空白RPMI-1640培养基（含1%双抗）500mL

*MEM培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500mL

空白MEM培养基（含1%双抗）500mL

*IMDM培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500ml

空白IMDM培养基（含1%双抗）500ml

*F12培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500 mL

空白F12培养基（含1%双抗）500 mL

*L-15培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500mL

空白L-15培养基（含1%双抗）500mL

*McCoy's 5A培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500mL

空白McCoy's 5A培养基（含1%双抗）500mL

*F12培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500 mL

空白F12培养基（含1%双抗）500 mL

*F12K培养基（含1%双抗+10%小牛血清）500 mL

空白F12K培养基（含1%双抗）500 mL

HAT筛选培养基无菌即用型500mL

HT筛选培养基无菌即用型500mL

特优级胎牛血清进口原装500mL

优级胎牛血清（无噬菌体，低内毒素）100mL

类标准胎牛血清（无噬菌体，低内毒素）100ml

新生牛血清（无噬菌体，低内毒素）200mL

排除其他原因：如更换培养条件（血清、培养基等）；使用器皿的洁净程度；

在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的*培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。由组织并分离分散细胞的方法可参阅有关文献。