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RAW264.7细胞,RAW264.7,小鼠单核巨噬细胞白血病细胞说明书

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产品型号

品       牌ATCC

厂商性质生产商

所  在  地上海市

更新时间:2016-04-20 10:32:42浏览次数:1662次

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RAW264.7细胞,RAW264.7,小鼠单核巨噬细胞白血病细胞说明书

RAW264.7简介以及操作步骤:

RAW264.7细胞,RAW264.7,小鼠单核巨噬细胞白血病细胞说明书细胞系特征

细胞株名称:RAW264.7

中文名称:小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

种属:小鼠; 雄性

组织来源:白血病

生长特性:半贴壁

形态特征:淋巴母细胞

微生物及支原体检测:阴性

细胞背景:此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。 可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。 可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。 LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。

安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

RAW264.7细胞,RAW264.7,小鼠单核巨噬细胞白血病细胞说明书培养条件:

*培养基:90%DMEM高糖+10%胎牛血清

血清我们推荐用:

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%

RAW264.7细胞,RAW264.7,小鼠单核巨噬细胞白血病细胞说明书传代方法:

收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

  • 如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。

()如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。

3. 6-8ml/瓶补加*培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。

注:1、观察细胞在低倍镜(45X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们。

冻存方法:

 

冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO

储存:液氮储存

 

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