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原位杂交制片(滴片/涂片)
服务介绍:
采集的液体标本(如血液、菌液、细胞等)均匀的涂抹或滴在玻璃片上制成的标本,用于后期原位杂交及相关实验室诊断等。
名称 | 规格 |
原位杂交制片(滴片/涂片) | 张 |
实验周期:
1个工作日。
实验流程:
涂片制备:
1.取细胞悬液,2800r 4℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀的细胞量加入2mL原位杂交固定液(动物)固定。若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000r/min,4℃离心10min。
2.取用固定液重悬的细胞悬液,2800r 25℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀加入PBS:
①若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000r/min,25℃离心10min,依然无沉淀时,留取底部约0.2mL的液体,再加入0.5mL的PBS混匀后用移液枪吸取200μL,滴于提前用组化笔画好的小圆圈中(3cm×2cm的椭圆);
②若细胞沉淀量很少,绿豆大小时,弃上清,留取底部沉淀,加入0.5mL PBS,用移液枪吹打混匀后,吸取200μL,涂于提前用组化笔画好的小圆圈中(3cm×2cm的椭圆);
③若细胞沉淀量很多,黄豆大小或更大时,弃上清,留取底部沉淀,加入2mL PBS,用移液枪吹打混匀后,吸取150μL,涂于提前用组化笔画好的大圆圈中(最-大长边约5cm,最-大短边约2cm的椭圆),在显微镜下观察细胞量的多少,若还是过厚,再用PBS对倍稀释该细胞悬液,直至在显微镜下观察到细胞量涂布均匀。
3.用枪将细胞悬液铺满整个圆圈,涂片放置自然晾干。
送样运输要求:
4℃保存运输
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