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服务介绍:
外泌体(exosome):是细胞主动向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡样小体,该囊泡可携带多种蛋白质、mRNA、miRNA等,参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。根据外泌体的大小和密度,用不同的离心速度,达到分离出外泌体的超速(差速)离心法,是学术上用的比较多且较认可的外泌体的提取方法,被认为是外泌体提取的黄金方法。
囊泡 | 大小(nm) | 密度(g/mL) | 来源 | 标记 |
外泌体 | 40-200 | 1.13-1.18 | 内体(endosomes) | tetraspanins, Alix, TSG101,CD4,CD9 |
微泡 | 200-2000 | 1.16-1.19 | 质膜(plasma membrane ) | integrins, selectins, CD40 |
凋亡小体 | 500-2000 | 1.16-1.28 | 质膜,内质网(plasma membrane, endoplasmic reticulum) | phosphatidylserine, genomic DNA |
Ref: Huilin Shao et al,New Technologies for Analysis of Extracellular Vesicles,Chem.Rev. 2018,118:1917-1950
外泌体应用领域:
外泌体参与不同细胞间的物质传输和信号传递;
外泌体具备一些免疫调节功能(由于有大量免疫相关分子:抗原传递分子、热休克蛋白等);
外泌体参与细胞废物的排泄和处理;
不同来源的外泌体有其特异性,存在着不一样的功能;
外泌体已广泛的被用在医学临床疾病的诊断以及相关预防研究上;
外泌体可能被当做一种药物的载体等
名称 | 规格 |
外泌体提取 | 样 |
实验流程:
低速离心去除碎片-过滤-高速离心-超速离心-蛋白浓度检测
注:外泌体 提取后,可另收费进行电镜负染和WB检测(tsg101,cd9,cd63三选二)
送样运输要求:
细胞上清样本:一个样本提供70ml的培养上清(细胞在含常规FBS培养基中培养一定时间,待细胞融合度约为60% - 70%时,移去原有含FBS的培养基,换成新鲜的含无外泌体血清的培养基,继续培养3天左右,细胞融合度达到80%-95%左右时,收取细胞上清),干冰运输到实验室。
血清样本:血液经普通采-血管采集后室温静置30min,3000g离心15min,收集上层血清,5ml,-80℃纯干冰运输。
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