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RNA提取逆转录

服务介绍：

细胞中的RNA可分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类，不同组织总RNA提取实质就是将细胞裂解，释放出RNA，并通过不同方式去除蛋白、DNA等杂质，最终获得高纯RNA产物的过程。再在逆转录酶的催化下，随机引物、oligo(dT)或基因特异性引物的引导下合成互补的DNA (complementary DNA，cDNA)。 

实验流程：

取材-RNA提取-测浓度-逆转录成cDNA 

其中mRNA、lncRNA、circRNA为普通逆转录；

miRNA采取特异性逆转录(需提供基因名称和种属，方便设计引物用于特异性逆转录 )，默认做茎环法的逆转录，如需做加尾法逆转录请特别备注说明。

送样运输要求：

1. 样品处理

a) 动物组织：常规组织100mg，脂肪组织，结缔组织，纤维化组织适当增加。将组-织剪切成合适大小后（建议组织块长宽高均不大于0.5 cm），然后迅速完-全浸泡于5～10倍体积的RNAsolid™试剂中。（注意：已浸入RNAsolid™试剂中的组织经平衡一段时间后，可从溶液中取出，切成更小的组织块，再重新放回RNAsolid™试剂中；有些比较弱的液体渗透性组织如骨头等，不适合用RNAsolid™试剂进行RNA保护。）

b) 植物组织：新鲜的叶、果肉、种子最少100 mg。将嫩叶，嫩茎组织切成合适的大小（建议长宽高均不大于0.5 cm）后，然后迅速完-全浸泡于5～10倍体积的RNAsolid™试剂中。（注意：某些植物组织天生具有的屏障，如叶子表面的蜡层可阻碍RNAsolid™试剂的渗透，对于此类组织，通常需破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。）

c) 细胞等样本：收集不少于10^6个细胞沉淀（用PBS清洗1-2次），干冰运输。

d) 酵母、细菌等样本：离心弃上清，收集一定量的菌体沉淀，干冰运输。

e)全血：最少1 mL新鲜血液EDTA抗凝管，干冰运输。

f)血清或血浆：最少1 mL，干冰运输。

g)RNA样品： OD260/280为1.8-2.0，浓度≥100 ng/μL，体积≥20μL，干冰运输。 

2. 样品保存及运输

加入有RNAsolid™试剂的样本可在37℃保存1～2天，2天以后部分组织中的RNA会开始降解。室温（25℃）稳定保存1周，不会有明显的RNA降解发生。大部分样品置于RNAsolid™试剂中，4℃条件下可稳定保存1个月，不会有明显的RNA降解发生。长期存放可先将保存在RNAsolid™试剂中的样本4℃浸透过夜，然后将RNAsolid™试剂吸出弃去，再将样本放入-20℃或-80℃长期稳定保存3～5年。