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植物总糖和还原糖（检测服务）

服务介绍：

植物总糖和还原糖检测试剂盒(DNS比色法)检测原理是还原糖在碱性加热条件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系，在540nm处用分光光度计测定棕红色物质的吸光度，该吸光度值与还原糖含量呈线性关系，利用标准曲线计算样品中的还原糖和总糖的含量。

背景介绍：

还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。例如，葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等都是还原糖。还原糖的主要特性是它们能够被特定的化学试剂（如Fehling试剂、Benedict试剂、二硝基水杨酸（DNS）试剂等）氧化，并产生明显的颜色变化。这种反应通常用于检测样品中还原糖的存在和含量。

操作步骤（仅供参考）：

还原糖的提取：

①称取植物样品0.5~3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次，洗出液也转移至该容器。

②50℃水浴30min，并不时搅拌，以便还原糖彻-底浸出。

③将沉淀和浸出液转移至50ml离心管，4000g离心5min。

④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸馏水，混匀，再次4000g离心5min。

⑤留取上清液，将2次获得的上清液合并，用蒸馏水定容至100ml(提取液)，混匀，作为还原糖待测液。

总糖的水解和提取：

①称取植物样品0.5~3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次，洗出液也转移至该容器。

②向容器中加入10ml 6M盐酸溶液，搅拌均匀，煮沸30min，并不时搅拌。

③取2滴滴加于载玻片上，滴加1滴显色液(约50ul)，检查水解是否完-全，如已经水解完-全，则不显示蓝色。

④水解完毕后，冷却至室温，加入6M氢氧化钠溶液，使溶液pH至7.4，用蒸馏水定容至100ml，混匀，4000g离心5min。

⑤取上清或滤液10ml，用蒸馏水定容至100ml，成稀释10倍的总糖水解液(提取液)，取0.5ml总糖水解液，测定其还原糖的含量。

稀释葡萄糖标准：取干净离心管，按下表操作，依次获得系列浓度的Glu标准。

加样：取5ml离心管，按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，小心混匀；如果样品中的糖浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2~3平行管，求平均值。

还原糖测定：混匀，以空白管调零，比色杯光径1cm，分光光度计测定540nm处标准管、测定管的吸光度。

实验结果：全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样须知：

1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务，提前一天联系

2.外地客户可邮寄样本，样本运输应符合一般的生物学要求，密封加冰袋或者干冰运输

3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性，请务必提前告知

4.测试结束提供实验报告后，样本可以保留1个月，若需保留样本或者回收样本请提前告知。

备注：本公司对客户的项目的专有技术和资料（包括实验方案，测试结果，样本等）负有绝对保密的责任。

仅供科研实验用，不做其他用途！

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