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ATP 含量测试盒

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更新时间:2024-10-07 21:17:24浏览次数:960次

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ATP 含量测试盒。是生物体内能量转换最基本的载体, 其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。

ATP 含量测试盒

(100 管/48 样)

一、检测意义:

三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换最基本的载体, 其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP 作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP 水平的改变,会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP 水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内 ATP 水平。通常ATP 水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时 ATP 水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。ATP 含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的 ATP 水平。

二、测定原理:

肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸,生成磷酸肌酸,用磷钼酸比色法进行检测。

三、试剂组成及配制:(100 管/48 样)(本试剂盒附送双蒸水一瓶,供客户配试剂时使用)

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[注]:本试剂盒中 ATP3# 粉剂-20℃冷冻保存,其余试剂 4℃保存,有效期 3 个月,开封后有效期为 1 个月。

四、样本前处理:

1、红细胞:抗凝全血取下层压积红细胞,一般按 1:4 的体积比加双蒸水进行稀释,再混匀使溶血,制备成溶血液。将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮 10分钟,取出混匀抽提 1 分钟,4000 转/分钟离心 10 分钟,取上清液待测。

2、组织样本:准确称取组织重,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的冷双蒸水,冰水浴匀浆, 制成 10%的匀浆液(取出部分 3500 转/分离心 10 分钟,取上清测定蛋白浓度),再置于沸水浴中煮 10 分钟,取出混匀抽提 1 分钟,3500 转/分离心 10 分钟,取上清液待

测。

3、培养细胞:先离心处理将细胞与培养上清分离,除去培养上清,得到下层沉淀细胞(一般细胞数量达到 106),将收集好的细胞加入 300~500μL 冷双蒸水,置于冰水浴中匀浆破碎(取出部分测定蛋白浓度),后将细胞悬液于沸水浴中加热 10 分钟,取出混匀抽提 1 分钟,即可用于测定。[注]:混匀抽提 1 分钟即为漩涡混匀 1 分钟。

五、操作步骤:

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ATP 含量测试盒



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