大鼠血管紧张素转换酶（ACE）elisa试剂盒使用说明书

大鼠血管紧张素转换酶(ACE)elisa试剂盒基本信息简介

血管紧张素转换酶是一种膜结合糖蛋白分子，测定方法是放射性同位素法。

中文名 血管紧张素转换酶 特    性 是一种膜结合糖蛋白分子 测定方法 放射性同位素法 关    系 慢性阻塞性肺部疾病及肺心病。ACE 是一种膜结合糖蛋白分子量为150000 含锌属二肽羧肽酶能使血管紧张素I(十肽由肾素转化而来，肽链C 末端的组氨酸和亮氨酸残基水解形成具有增压作用的血管紧张素II(八肽) 。后者通过与血管气管平滑肌作用引起血管支气管收缩ACE 也具有降血压作用并参与缓激肽P 物质等多肽性炎性物质的灭活ACE 。还能直接作用于肾上腺皮质促进醛固酮分泌因此ACE 是肾素血管紧张素醛固酮系统以及缓激肽系统的重要调节因素，影响人体多种生理机能ACE分布于全身各组织以肺副睾睾丸zui高。其次为十二指肠胰卵巢主动脉甲状腺脾肾与肝的含量甚微此外巨噬细胞单核细胞人胎膜胎盘羊水和脐静脉血也含此酶各组织ACE主要定位于毛细血管内皮细胞由于肺组织具有丰富的血管床且肺毛细血管床内皮细胞所含的ACE 位于细胞外(外周血管床内皮细胞所含的ACE 位于细胞内) 促使血管紧张素I 转化为血管紧张素II 的作用强且肺循环是体内*不使血管紧张素II 灭活的血管床肺循环流出的血液中血管紧张素II 的含量zui高一般认为血管内皮细胞的ACE 与胞膜密切结合几乎不释放ACE 而巨噬细胞和单核细胞产生的ACE 大部分释放入血故当ACE 升高时应考

虑为巨噬细胞 单核细胞系统的分泌亢进多数报道血清ACE 活性无性别年龄吸烟体位时间变化清醒睡眠状态不影响ACE 的活性早产儿足月儿新生儿及健康成人的血清ACE 活性无明显差别但李平生等 Ucer G.报道ACE 活性男大于女Ucer G.(1)等报道血清ACE 活性与吸烟年龄性别有关,与氧分压呈负性相关。

大鼠血管紧张素转换酶(ACE)elisa试剂盒基本信息检测方法简介

实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

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