信帆生物告诉您:ELISA实验样本处理方法
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elisa实验的样本处理方法如下:
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1. 血清:
室温血液自然凝固 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保 存过程中如有沉淀形成,应再次离心
2. 血浆:
应根据标本的要求选择 EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分 钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀 形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
信帆生物告诉您:ELISA实验样本处理方法
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/ml 左 右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟 左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融 化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀 浆器将标本匀浆化。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检 测,其余冷冻备用。
组织匀浆,按照10%进行匀浆,即1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液可以选取生理盐水,也可以选取PBS,但一般是选PBS,PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol.
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