人内皮素-1（ET-1）试剂盒实验原理以及操作步骤

人内皮素-1（ET-1）酶联免疫分析试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人内皮素-1（ET-1）水平。用纯化的人内皮素-1
（ET-1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素-1（ET-1），
再与HRP 标记的内皮素-1（ET-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗
涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终
的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素-1（ET-1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测
定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人内皮素-1（ET-1）浓度。

人内皮素-1（ET-1）酶联免疫分析试剂盒操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔*孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
 

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