大鼠细胞色素P450(CYP450)免疫组化试剂盒
【简单介绍】
【详细说明】
大鼠细胞色素P450(CYP450)免疫组化试剂盒
英文名称:Rat cytochrome P450,CYP450 Immunohistochemistry试剂盒
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大鼠细胞色素P450(CYP450)免疫组化试剂盒原理:
该试剂盒以HRP 标记的链霉亲和素复合物(HRP Streptavidin Conjugate,HRP-SA)为基础,可用于检测细胞、组织内的特异性RAR-α 抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的一抗与相应靶抗原结合后,用生物化二抗与一抗特异性结合,zui后加入HRP-SA,形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA 复合物,显微镜下观察成像。
大鼠细胞色素P450(CYP450)免疫组化试剂盒组分:
1.已稀释的即用型一抗(2.5ml)(*分装)
2.生物素化羊抗兔IgG 1 支(*分装)
(浓度1.5 mg/mL,稀释比为1:300~1:500)50 μL+抗体稀释液20ml
3. HRP-SA 复合物1 支(浓度1 μM,稀释比1:50~1:200)100 μL
4. 封闭缓冲液(封闭用) 20 mL
5. Tween 20 5 mL
6. DAB 显色液 5ml
7. 中性树胶 10ml
用户自备试剂:
1. 10mM TBS(pH7.2~7.4),三羟基氨基甲烷1.21g,氯化钠7.6g,加蒸馏800mL,浓盐酸调pH 值至7.2~7.4,zui后定容至1000mL。
TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%体积比)
2.抗原修复液(依检测抗原不同而选择不同的修复液)
10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液,柠檬酸0.38g,柠檬酸三钠2.45g,加蒸馏水900mL,浓盐酸调pH 值至6.0,zui后定容至1000mL,或:0.5M EDTA 修复液(pH8.0)
EDTA·2H2O 186.1g,柠檬酸三钠2.45g,加蒸馏水700mL,用10mM NaOH 调pH 值至8.0,zui后定容至1000Ml
注意事项:
1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。
3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS 充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会影响结果观察。
5. 如须复染细胞核,则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。
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