Anti-CSP/FITC抗体,Anti-CSP/FITC抗体
【简单介绍】
【详细说明】
Anti-CSP/FITC抗体,Anti-CSP/FITC抗体常用的标记蛋白质的方法有搅拌法和透析法两种。以FITC(异硫氰酸荧光素)标记为例,搅拌标记法为:先将待标记的蛋白质溶液用0.5ml/L pH9.0的碳酸盐缓冲液平衡,随后在磁力搅拌下逐滴加入FITC溶液,在室温持续搅拌4~6h后,离心,上清即为标记物。此法适用于标记体积较大,蛋白含量较高的抗体溶液。优点是标记时间短,荧光素用量少。但本法的影响因素多,若操作不当会引起较强的非特异性荧光染色。透析法适用于标记样品量少,蛋白含量低的抗体溶液。此法标记比较均匀,非特异染色也较低。方法为:先将待标记的蛋白质溶液装入透析袋中,置于含FITC (异硫氰酸荧光素)的0.01mol/L pH9.4碳酸盐缓冲液中反应过夜,以后再对PBS透析法去除游离色素。低速离心,取上清。用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。Anti-CSP/FITC抗体,Anti-CSP/FITC抗体 荧光素标记抗体技术是指在碱性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测,目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。该技术的主要操作步骤是:将纯化的IgG抗体对PH9~9.5碳酸盐缓冲液透析过夜,透析后抗体液移入小烧杯中,称取适量IFTC,加入二甲亚砜(DMSO)(FITC~1mg/1ml DMSO),使终浓度为1mgFITC/1mlDMSO,FITC/IgG比例:如IgG浓度为1mg/ml,FITC/IgG比例约为50μgFITC/mgIgG,如IgG为5~10mg/ml,则比例为25μgFITC/ml IgG,在10ml小烧杯中先放入抗体,按上述比例将FITC-DMSO溶液逐滴加入透析后的抗体溶液中,将标记物用PBS加至2.5ml,磁力搅拌器室温下避光搅拌2h,用PD10柱(Sephadex G25柱)除去游离荧光素,先用25ml PBS淋洗G25柱, 收集PBS洗脱*个荧光素结合蛋白峰,测定F/P比值(合适的F/P值为2~4)。
上海安妍生物现货直销,免费送货上门。规格:0.1ml,0.2ml;浓度:1mg/ml;类型:标记一抗抗体;价格:电询;运输方式:低温保存运输。应在低温下保存,长时间在暴露在空气中,含量会有所降低。
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