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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
|---|
产品介绍
产品简介
Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。Buffer和酶的设计，可用于一步法 RT-qPCR 冻干反应体系的配制和产品设计。
本试剂盒利用耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA，并利用 UNICON® HotStart Taq DNA
Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的冻干 Buffer，Enzymes Mix 等，并添加了有效抑制非特异性 PCR 扩
增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子，能够在保证引物扩增效率的同时，进行多重荧光定量扩增反应。
本试剂盒中匹配了冻干保护剂，可以用于冻干。
产品信息
货号 | 11831ES60 / 11831ES80 / 11831ES92 |
规格 | 100 T / 1000 T / 10000 T |
组分信息
组分编号 | 组分名称 | 11831ES60(100 T) | 11831ES80(1000 T) | 11831ES92(10000 T) |
11831-A | 4×Hifair® Lyo-Buffer | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
11831-B | Hifair® Lyo-Enzyme Mix | 100 μL | 1 mL | 10 mL |
11831-C | 冻干保护剂 | 800 μL | 8 mL | 80 mL |
【注】1) 4×Hifair® Lyo-Buffer 为 Lyo Multiplex One Step RT-qPCR kit 的简写。
2) Hifair® Lyo-Enzyme Mix 主要包含有耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 和 UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
运输条件
1. 保存方式：
Part 1： 11831-A【 4×Hifair® Lyo-Buffer 】、11831-C【 冻干保护剂 】，-25~-15℃ 保存，有效期 1 年。
Part 2： 11831-B【 Hifair® Lyo-Enzyme Mix 】，2~8℃ 保存，有效期 6 个月。
运输方式：冰袋运输。
使用方法
反应体系（以25uL体系为例）
组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
4×Hifair® Lyo-Buffer | 6 | 1x |
Hifair® Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
冻干保护剂 | 8 | - |
Primer Mix(10μM) | 1 | 0.1-1 uM |
Probe Mix(10μM) | 0.5 | 0.05-0.5 uM |
模板RNA | 5 | - |
DEPC H20 | up to 25 | - |
参考扩增程序
1）常规扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
逆转录 | 50℃a | 10 min | 1 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
扩增反应 | 95℃ |
| 45 |
60℃b | 30 secc |
2）快速扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
逆转录 | 50℃a | 2 min | 1 |
预变性 | 95℃ | 2 sec | 1 |
扩增反应 | 95℃ |
| 45 |
60℃b | 13 secc |
【注】a. 逆转录：42℃或者50℃均可。
b. 扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。
c. 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。
适用机型
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
