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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 货号 | 11213ES60 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
产品介绍
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） | *（元） |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit 多重定量PCR反应(RT-qPCR)试剂盒 | 11213ES60 | 100 T | 2782.00 | 780.00 |
11213ES76 | 500 T | 11682.00 | 3270.00 | |
11213ES80 | 1000 T | 21832.00 | 6800.00 | |
11213ES92 | 10000 T | 168882.00 | 60000.00 |
产品描述
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit多重定量PCR反应(RT-qPCR)试剂盒是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer，Enzymes Mix等，缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子，能够在保证引物扩增效率的同时，进行多达四重的反应。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |||
11213ES60 (100 T) | 11213ES76 (500 T) | 11213ES80 (1000 T) | 11213ES92 (10000 T) | ||
11213-A | 2×HU® MP Buffer | 1.25 mL | 6.25 mL | 12.5 mL | 125 mL |
11213-B | HU® Enzyme Mix | 100 μL | 500 μL | 1 mL | 10 mL |
【注】：1）2×HU® MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。
2）HU® Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
适用机型
需添加High Rox适用机型： ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
需添加Low Rox 适用机型： ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
不需要Rox校正的仪器型号：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
运输与保存方式
冰袋运输。-20°C保存，有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
反应体系（以25 μL为例）
组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
2×HU® MP Buffer | 12.5 | 1× |
HU® Enzyme Mix | 1 | - |
Primer Mix (10 μM) | 各1 | 0.4 μM |
Probe Mix (10 μM) | 各0.5 | 0.2 μM |
模板 RNA | 1-10 | - |
RNase Free H2O | to 25 | - |
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.25 μM，也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。
c) 探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
c) 模板稀释：qPCR灵敏度*，建议将模板进行稀释使用，控制Ct在20-35之间适宜。
d) 反应体系：推荐使用25-50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
1 | 逆转录 | 50°Ca | 10 min | 1 |
2 | 预变性 | 95°C | 5 min | 1 |
3 | 扩增反应 | 95°C | 15 sec | 45 |
60°Cb | 30 secc |
【注】：
a) 逆转录：42°C或者50°C均可。
b) 扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。
c) 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。
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Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) | 11214ES60 | 100 T | 3062.00 |
11214ES80 | 1000 T | 24062.00 | |
11214ES92 | 10000 T | 185762.00 |
HB220223
