联系电话
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初级会员·12年
具体成交价以合同协议为准
- 联系人：
- 曹女士
- 电话：
- 400-6111-883
- 手机：
- 售后：
- 4006-111-883
- 传真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦东新区天雄路166弄1号3楼
- 网址：
- www.yeasen.com
扫一扫访问手机商铺
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 货号 | 11212ES03 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
产品介绍
产品描述
多重荧光定量PCR预混液(含UDG)本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。本产品含有UDG酶，可有效防止气溶胶污染的风险。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | ||||
11212ES03 (1 mL) | 11212ES08 (5×1 mL) | 11212ES12 (12.5 mL) | 11212ES60 (20×5 mL) | 11212ES62 (125 mL) | ||
11212 | 2×Hieff Unicon® Universal TaqMan qPCR mix (UDG plus) | 1 mL | 5×1 mL | 12.5 mL | 20×5 mL | 125 mL |
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
一、关于操作
1）请于使用前确保产品*解冻并*混匀，短暂离心收集至管底后，置于冰上备用。
2）为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3）使用过程中避免产品的反复冻融。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
二、实验方法
a) 引物设计
1. 引物必须具有特异性。
2. 引物的Tm值必须在58-60°C，而且各组引物的Tm差异应控制在1-2°C。
3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
b) 探针设计
1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10°C（68-70°C）。
2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
反应体系f
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
2×Hieff Unicon® Universal TaqMan qPCR mix (UDG plus) | 12.5 | 1× |
Primer mix (10 μM) | X | 0.1-0.5 μMa |
Probe mix (10 μM) | X | 50-250 nMb |
Rox reference dyec | 0.5 | 1× |
Template DNA/cDNAd | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25e | - |
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
b) 探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整。
c) Rox reference dye：使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差；本产品不含Rox reference dye。如需，推荐使用货号10200ES产品。
d) 模板稀释：qPCR灵敏度*，建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液，则模板体积不超过总体积的1/10；
e) 反应体系：推荐使用25 μL、30 μL或50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
f) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
参考扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
污染降解 | 25℃ | 10 min | 1 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 15 sec | 45 |
退火/延伸a | 60℃ | 30 secb |
【注】： a) 退火/延伸：温度和时间可根据实验要求适当调整。
b) 荧光信号采集：请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置，几种常见仪器的时间设定如下：
20 sec：Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec：Applied Biosystems 7300
32 sec：Applied Biosystems 7500
相关产品
产品名称 | 货号 | 规格 |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES03/09/61 | 1 mL/5 mL/100 mL |
Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶单克隆抗体 | 31301ES60/80/90/92/93/94 | 100 μg/1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1000 mg |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 热敏UDG | 10303ES60/76/96/98 | 100 U/500 U/10000 U/100000 U |
dUTP, 100 mM Solution 脱氧尿苷三磷酸溶液（100 mM） | 10128ES72/80/96/98 | 250 μL/1 mL/25 mL/500 mL |
HB220224
