Matrixgel, Reduced Growth Factor

Matrixgel 基底膜/基质胶（低生长因子）

产品信息

产品描述

Matrixgel基底膜/基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出来的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包含生长因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，Matrxigel聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵袭和基因表达等的研究。

Matrixgel基底膜/基质胶形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、塞尔托利氏细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。Matrixgel能影响成鼠肝脏细胞和人乳腺上皮细胞三维培养物的基因表达。同时，Matrixgel可用作多种肿瘤细胞侵袭研究的基本支架，体内外血管新生研究*的基质，以及体内动物模型移植瘤细胞生长的三维支架。Matrixgel还能支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。

（Matrixgel RGF）是低生长因子的基质胶，基于标准级别的基底膜/基质胶（Yeasen, Cat# 40111ES08）进一步纯化以去除其内所含的生长因子水平，包括EGF、IGF、FGF、TGF-β 等，其中TGF-β 由于偶联在胶原酶IV上和/或在纯化过程中与胶内的主要成分聚集在一起，浓度降低的相对比较少。本基质胶（低生长因子）适用于更广的细胞培养研究，包括2D/3D培养、血管生成、肿瘤细胞迁移和细胞侵袭、体内肿瘤模型建立等。特别适用于对基质成分更为严格的实验，如信号转导相关研究、阐释生长因子功能的研究或者基因表达研究等。本品为无菌制品，浓度为9-20mg/ml。

运输与保存方法

干冰运输。

-20℃保存，有效期6个月。保持冻存！

产品使用

1. Matrixgel基底膜/基质胶（低生长因子）的融化与保存

特别注意：Matrixgel RGF对温度非常敏感，千万不可多次重复冻融。Matrixgel RGF的分装以及凝胶前的准备过程中都必须在冰上（4℃）操作，因为温度稍微升高，都很可能出现成胶现象，从而导致基质不均匀或者影响后续的凝胶。用来盛放的试管或者分装的枪头都必须进行预冷。

a）收到产品后，如果暂时不使用，请整瓶直接放到-20℃冻存（不要放在无霜冰箱内）。

b）*次使用，将整瓶Matrixgel放到4℃ 一晚，使其充分融解。低速漩涡使产品分布均匀后，快速置于冰上，用70%乙醇擦拭瓶盖及周围，自然晾干后。无菌环境下，用预冷的枪头以合适的量进行小管分装。留一管放到冰上，其余的放到-20℃冻存。

2.   Matrixgel基底膜/基质胶（低生长因子）的使用

特别注意1：Matrixgel RGF可通过多种方法来使用，薄胶（thin gel）适用于细胞铺于凝胶上层培养，厚度约0.5mm；厚胶（thick gel）适用于细胞在凝胶内部培养，厚度约1mm。薄层包被（thin coating），没有凝胶（no gel）形成，仅提供混合的蛋白层，使得细胞在上层生长。薄层包被可用于细胞粘附实验，但不适合做细胞分化研究。初次使用需要根据zui终的实验目的来选择合适的方法。

特别注意2：Matrixgel RGF在22-35℃能够快速成胶。为了保证Matrixgel RGF基质的成胶性能与稳定性，zui终稀释浓度不应低于3 mg/ml（Matrixgel RGF原液的浓度因批次不同有差异）。可用无血清培养基来稀释Matrixgel RGF，稀释后需要立即使用。

A. 薄胶制备方法

1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrixgel RGF。

2）将需要使用的培养板置于冰上，按50μL/cm²生长面积的浓度加入Matrixgel RGF。

3）在37℃放置30分钟。

4）如需吸除未凝固的Matrixgel RGF，则可在使用前用无血清培养基轻轻冲洗，但要确保吸头不触碰到已凝基质层，吸除冲洗液后即可使用。

B. 厚胶制备方法

1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrixgel RGF。

2）将需要使用的培养板置于冰上，将培养的细胞与Matrixgel RGF混合，用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照150－200μL/cm²生长面积的浓度加入。

3）在37℃放置30分钟；此时即可加入细胞培养液。细胞也可生长在此厚胶的上层。

C．薄层包被方法

1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrixgel RGF。

2）采用无血清培养基稀释Matrixgel RGF到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验，从而确定*的包被浓度。

3）将稀释的Matrixgel RGF加入需要包被的培养器皿中，包被量至少覆盖细胞的所有生长表面。室温下孵育1小时。

4）去除未凝固结合的Matrixgel RGF，用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。

注意：Matrixgel RGF包被的平板当天使用，但也可根据具体应用调整。包被好的平板加入培养基后，在37℃zui高可存放1周。

注意事项

1）Matrixgel RGF的充分融化至少需要4℃一晚，某些情况下，产品浓度很高，则需要更久的时间来融胶。

2）整个操作过程中，移液器，枪头以及试管都必须提前遇冷，因为 Matrixgel RGF在超过10℃的情况下就会开始成胶。

3）对于小管形成实验，Matrixgel RGF的浓度不少于10 mg/ml。

4）Matrixgel RGF的使用浓度不要低于3 mg/ml。体内实验为了防止不充分成胶，Matrixgel RGF的浓度不要低于4 mg/ml。

5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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