Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®

——DNA稳定建库

1、研发背景

稳定的建库产品，您用对了吗？

DNA文库制备是高通量测序前期的核心环节，文库的产量与质量直接决定了测序数据的产量与质量。但目前市面上多数试剂盒的建库方法，耗时、昂贵且操作非常繁琐的。这些方法在性能方面也存在一定的缺陷：如仅适用于DNA量充足且品质较好的样本、Input DNA-片段化不*、常出现形成G尾、聚合物等副反应或测序文库表现出一定的偏好性等。这些情况显著降低了DNA文库的转化率，并且极大影响后续测序数据的覆盖度和准确度。

Yeasen MaxUp，您的高通量测序建库的！

翊圣生物根据现状，集中海内外高通量测序领域的科研人员，历时数年，开发了Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®常规DNA建库试剂盒，从产品设计，产品原料选用，产品性能优化，产品性能验证，产品标准制定，到产品成型，产品规模化生产，每一步都在严苛的标准、精细的研究中，实现了产品品质的飞跃。

Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®在文库产量与质量方面表现：DNA的文库构建步骤少、转化率高，相对进口同款品牌至少高出20%，使文库扩增循环数更低，显著降低了测序数据的冗余度和偏好性。在建库速度、简便性、性价比以及样本适用性方面，达到*品质。

2、产品描述

Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®是针对Illumina^®高通量测序平台专业开发设计的建库试剂盒。本试剂盒可将低至1ng的微量片段化DNA制备成适用于Illumina^®测序平台的文库。该试剂盒精心优化的配方体系，使他广泛适用于各种DNA样本。试剂盒整合了多个酶反应步骤，提供简并、线性化的操作方案，显著提高DNA建库效率。

Hieff NGS^TM产品具有严格的生产工艺，保证提供的每批次产品都经过严格的质量控制和功能验证，zui高程度保障产品优异性能与批间稳定性。

1）2.75小时建库

Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®提供简并的、线性化的操作方案，将DNA建库时间缩短至2.75小时以内。

图1 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®相对进口品牌N*Ultra同类型产品，建库更快。

2）文库转化率高

文库转化率，即DNA-片段转化为双端带特定接头DNA-片段的效率，是衡量建库试剂盒效率的重要指标。文库转化率强烈影响文库的多样性和质量，文库转化率高在一定程度上意味着测序覆盖度更好。

图2 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®相对进口品牌N*Ultra同类型产品具有更高的文库转化率。

样本：片段化E.coli gDNA。接头比例：按各款试剂盒中推荐的数值。测定方法： qPCR文库定量。

3）文库扩增循环数少

获得特定产量文库所需的PCR循环数，是衡量试剂盒建库效率的另一重要指标。PCR循环数不足，可能造成文库产量低；PCR循环数过高，又将导致文库偏好性增加、冗余度增加、嵌合产物增加、扩增突变积累等多种不良后果。在获得相同产量文库时，使用的PCR循环数越少，表示试剂盒的建库效率更高。

表1 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®相对进口品牌N*Ultra同类型产品具有更低的扩增循环数。

4）优异的文库质量

使用Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®对100 ng E.coli gDNA建库，所得文库均为单一条带，正态分布，无杂峰，片段大小符合测序要求。

图3 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®所建文库Agilent 2100 Bioanalyzer检测。

建库样本：片段化E. coli gDNA。双轮分选比例（Post-adapter Ligation）：0.6×/0.2×和0.55×/0.15×。

5）的测序数据

测序数据是反映建库试剂盒性能的zui重要指标。使用Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®和N*Ultra品牌同类型产品用于大肠杆菌基因组DNA文库构建，并使用Illumina^® Hiseq 4000平台，以PE150模式进行测序。所得Q30、碱基质量，Mapped Reads以及Coverage等方面均与品牌N*Ultra同类型产品相当，表现优异。

表2 大肠杆菌K12菌株基因组DNA测序数据统计。

Input DNA: 100ng. Illumina Hiseq 4000, PE 150, reference genome: Escherichia coli str. K-12 substr. MG1655.

图4. Yeasen样品测序数据Fastqc报告（左：序列质量分布；右：碱基分布）。

6）*的性价比

Yeasen致力于为您提供的产品！！

图5 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®性价比更高。

3、产品应用：

将1ng-1μg片段化DNA制备成适用于Illumina^®测序平台的文库。

4、文献引用

[1] Head S R, Komori H K, LaMere S A, et al. Library construction for next-generation sequencing: overviews and challenges[J]. Biotechniques, 2014, 56(2): 61.

[2] Parkinson N J, Maslau S, Ferneyhough B, et al. Preparation of high-quality next-generation sequencing libraries from picogram quantities of target DNA[J]. Genome research, 2012, 22(1): 125-133.

[3] van Dijk E L, Jaszczyszyn Y, Thermes C. Library preparation methods for next-generation sequencing: tone down the bias[J]. Experimental cell research, 2014, 322(1): 12-20.

[4] Wolf K, O'Neil D, Schroeer S, et al. Next‐Generation Sequencing Library Preparation from FFPE Tissue Samples[J]. Current Protocols in Molecular Biology, 2016: 7.24. 1-7.24. 14.

[5] Apone L, Liu P, Panchapakesa V, et al. Enhancing clinical utility of NGS with reduced bias, low DNA input, library construction[J]. 2016.

5、常见问题

Q: 该款试剂盒适用于哪些样本的建库？

A：本试剂盒适用于所有样本的DNA建库。

Q: 在使用该款试剂盒时，不同类型的样本的Input DNA量应为多少？

A：Input DNA特指投入末端修复/dA尾添加步骤中的DNA。下表列举了本试剂盒在常见应用中推荐的Input DNA量。

表1 常见应用中推荐Input DNA量

【注】：上表为使用高质量DNA时推荐的Input DNA量，当Input DNA质量较差或需要进行片段分选时，应适当上调使用量。

Q: 文库制备过程中，是否需要片段长度分选？

A：文库制备过程中需要进行片段长度分选。分选步骤可选择在末端修复/dA尾添加之前，或在接头连接之后，或在文库扩增之后进行。当Input DNA质量≥50ng，您可选择在接头连接后分选；如Input DNA质量<50ng，建议您在文库扩增后进行分选。

Q: 使用该款试剂盒所得的文库是否可以用于Ion Torrent平台？

A：本款试剂盒针对Illumina^®平台开发，所得文库仅适用于Illumina^®平台。

Q: 产品的有效期与保存方法？

A：产品所有组分-20°C保存，有效期1年。

Q: 纯化和分选步骤，可以使用哪些磁珠？

A：纯化和分选步骤，建议使用Hieff NGS^TM DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。

6、订购信息

7、相关产品推荐

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