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Hieff TransTM脂质体转染试剂,让您对转染自信满满

2017-5-5  阅读(2518)

分享:

——效率高不高,一转便知道

 

关键词:liposomal ; transfection ; lipo2000 ; lipo3000

 

转染效率低,细胞毒性大,操作步骤太繁琐?怎么办?

 

你需要有一种超能力的转染试剂来成就你的转染实验

 

    转染能够让我们更好的研究目的基因是如何在细胞中进行表达和调控。目前常见的转染方法有:磷酸钙共

 

沉淀法、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、机械法(如显微注射和基因枪法)、阳离子脂质体试剂,其中

 

阳离子脂质体试剂转染是目前zui常用的转染方法。

 

       Hieff TransTM脂质体核酸转染试剂作为一款阳离子脂质体转染试剂,与应用的Lipo2000相比,

 

具有更高的转化效率和更加便捷的操作。目前已经在多种细胞系中得以验证,如常见的细胞系293THela

 

MCF-7以及相对应用比较少的Raw264.7COS-7Hep3B等细胞。其中常见细胞系的转染效率达90%以上,

 

远远可以满足我们对于转染实验的需求。

 

作用原理:

 

    阳离子能够通过表面所带正电荷的静电作用将核酸包裹,形成核酸-脂质体复合体。细胞膜表面带负电

 

荷,能够将该复合体吸附,被吸附后的复合体能够通过膜的融合作用或者细胞内吞的方式形成包涵体进入细

 

胞。有小部分的DNA 能够从包涵体中被释放,并进入细胞质中,再进一步进入细胞核内转录、表达。

 

 

 

1:脂质体介导的转染和内吞过程

 

产品特点:

 

性: 可对大多数真核细胞进行转染,并且对于常见细胞系转染效率达90%以上。

 

低毒性:转染细胞形态良好并产生大量的转染基因蛋白

 

操作简便:可以直接将脂质体复合物加入到含血清的培养基中。

 

多样性:适合瞬时转染和稳定转染。

 

 

 

操作流程:

 

 

 

 

 

2:细胞转染实验流程

 

产品数据:

 

客户提供部分细胞系转染数据(仅供参考)

 

 

细胞

 

培养板

 

细胞密度

 

DNA

 

Hieff Trans

 

效率

 

293T

 

6

 

80%

 

1μg

 

2μl

 

90%

 

293FT

 

24

 

85%

 

1μg

 

4μl

 

90%

 

Hela

 

12

 

90%

 

0.2μg

 

0.6μl

 

90%

 

Raw264.7

 

35mm

 

80%

 

1μg

 

2μl

 

90%

 

Hek293

 

6

 

95%

 

2μg

 

10μl

 

80-90%

 

NCI-H1975

 

6

 

80%

 

4μg

 

10μl

 

80%

 

3t3

 

12

 

90%

 

1μg

 

5μl

 

50%

 

 

验证过的细胞系

 

 

293T

 

293FT

 

HEK293

 

HEK 293T

 

Caco2

 

COS-7

 

DF-1

 

Lenti X-293T

 

HeLa

 

HepG2

 

LM3

 

MCF-7

 

MDA-MB-231

 

MEF

 

NCI-H1975

 

NIH-3T3

 

PC12

 

Raw264.7

 

Vero

 

H9c2

 

Hepa1-6

 

MCF10A

 

CHO

 

5-8F

 

BV-2

 

A549

 

3t3

 

H520

 

HUVEC

 

C6

 

HaCaT

 

N2A

 

SGC-7901

 

H9

 

MKN-28

 

Hep 3B

 

SMCC7721

 

RKO

 

C2C12

 

More…

 

客户反馈结果展示

 

 

 

 

Hieff TransTM Liposomal 转染应用

           

           

 

细菌蛋白激活细胞自噬体形成

 

细胞:Hela   转染质粒:细菌效应蛋白A   LC3II:自噬体标记蛋白

 

细胞分裂纺锤体结构

 

细胞Hela   转染质粒:Flag-tubulin   细胞核染色:Hoechst33342

 

 

 

DNA转染

 

 

DNA转染

     

 

          

         

 

Hieff Trans

 

Lipo3000

 

 

Hieff Trans

 

Lipo2000

 

图片来源:复旦大学 细胞系:Hek293 核酸类型:DNA

 

 

图片来源:长春应化所 细胞系:Hela 核酸类型:DNA

 

 

价格比较:

  

       

 

单次反应各公司价格对比

 

常见问题:

 

Q1:配制核酸转染试剂复合物时能否有血清的存在?

 

答:血清的存在会影响脂质体的形成,建议配制核酸转染试剂复合物时采用无血清培养基(一般推荐MEM培养

基)。

 

Q2:转染实验过程中是否需要更换成无血清培养基?

 

答:不需要,我们的转染试剂可以在含血清的介质中进行转染的过程。

 

Q3:转染后需要进行终止吗?

 

答:不需要脂质体复合物可以稳定存在6个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液,为了保证细胞正常

生长所需的营养,需要在46小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液则在脂质体转染后不需要

进行再次换液

 

Q4:转染试剂的保存及使用过程中的注意事项?

 

答:本试剂一定要4℃保存,要注意避免反复多次长时间开盖,长时间开盖会导致脂质体氧化而影响转染效

率。

 

Q5:若想提高转染效率,应该注意什么?

 

答:a:转染时细胞的密度,90%-95%

 

b:转染时,核酸和脂质体稀释液要用MEM无血清培养基。

 

c:转染后4-6h可选择换液。

 

参考文献:

 

Su D N, Wu S P, Chen H T, et al. HOTAIR, a long non-coding RNA driver of malignancy whose

expression is activated by FOXC1, negatively regulates miRNA-1 in hepatocellular carcinoma[J].

Oncology Letters, 2016, 12(5):4061.

 

我们的回报——有买有

 

产品信息:

 

 

货号

 

名称

 

规格

价格(元)

*(元)

 

40802ES03

 

Hieff TransTM 脂质体核酸转染试剂

 

1.0mL

 

1308.00

 

868.00

 

购买/

 

赠送/

 

5

 

3

 

15

 

15

 

30

 

40

 

50

 

70

 

活动条款:

 

1.活动时间:2017.4.10-2017.6.30

 

2.本活动可与“整装待发 翊起GO”活动叠加参与;

 

3.本活动zui终解释权归上海翊圣生物所有。

 

产品订购:

 

 

产品名称

 

产品编号

 

规格

 

价格(元)

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

 

40802ES02

 

0.5 mL

 

738.00

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

 

40802ES03

 

1.0 mL

 

1308.00

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

 

40802ES08

 

5×1 mL

 

4878.00

 

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100μL

 

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Hieff TransTM悬浮细胞脂质体核酸转染试剂

 

40805ES02

 

0.5 mL

 

948.00

 

Hieff TransTM悬浮细胞脂质体核酸转染试剂

 

40805ES03

 

1.0 mL

 

1678.00

 

Hieff TransTM悬浮细胞脂质体核酸转染试剂

 

40805ES08

 

5×1 mL

 

5268.00

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