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用于原核细胞转染
2015-10-10 阅读(1316)
关键词:原核细胞、转染、Primary Cells、T细胞、干细胞、神经干细胞、原位转染、电转
产品信息（50多种原代细胞转染试剂盒供您选择）
产地 | 货号 | 名称 | 规格 | 报价/元 | */元 | 仪器型号 | 货期 |
Lonza | VPA-1002 | Human T Cell Nucleofector? Kit | 25 Test | 6800 | 4400 | Nucleofector? II/2b | 现货 |
Lonza | VPG-1004 | Mouse Neural Stem Cell Nucleofector? Kit | 25 Test | 6800 | 4400 | 现货 | |
Lonza | VPH-1001 | Mouse ES Cell Nucleofector? Kit | 25 Test | 6800 | 4400 | 现货 | |
Lonza | VPI-1005 | Basic Epithelial Cells Nucleofector? Kit | 25 Test | 6800 | 4400 | 现货 | |
Lonza | VPI-1002 | Basic Fibroblasts Nucleofector? Kit | 25 Test | 6800 | 4400 | 现货 | |
Lonza | VPI-1003 | Basic Kit for Primary neural cells | 25Test | 6800 | 4400 | 4周 | |
Lonza | V4XP-3024 | P3 Primary Cell 4D X Kit L | 24 Test | 6400 | 4120 | 4D-Nucleofector? X Unit | 现货 |
Lonza | VAPH-5022 | Human Stem Cell Kit 2 | 10 Test | 3400 | 2180 | Nucleofector? II/2b Device | 现货 |
Lonza | VAPH-5012 | Human Stem Cell Kit 1 | 10 Test | 3400 | 2180 | 现货 |
Nucleofector Kits for Primary Cells
——用于原核细胞转染
（一）适用于Nucleofector? IIs/2b转染仪试剂盒
Nucleofector? IIs/2b转染仪是一种单孔细胞核转染仪，支持单孔电转杯的转染平台，适用于难转染细胞系和原代细胞的转染，同时也适用于细菌转化。
Lonza公司推出的Nucleofector Kits for Primary Cells（原代细胞试剂盒）系列产品可用于Nucleofector? IIs/2b转染仪，每种原代细胞都有专门的试剂盒及操作手册。原代细胞试剂盒由不同的规格，10、25、4x25次反应。试剂盒内除含有特异的核转染液（Nucleofector?溶液），另外含有pmaxGFP?对照载体。Lonza公司有50多种原代细胞转染试剂盒。
试剂盒组分
1. 细胞特异性核转染液
2. 添加剂
3. 一次性吸管（与单孔电转杯配套）
4 .pmaxGFP? 阳性质粒
5. 单孔电转杯（100μl）
（二）适用于4D-Nucleofector? X Unit试剂盒
4D-Nucleofector细胞核转染系统采用导电性聚合物，取代了金属铝离子，保证转染的同时获得高的细胞存活率。
Lonza公司目前有5种不同的原代细胞转染液（Nucleofector? Solutions）可适用于4D-Nucleofector系统，分别为P1, P2, P3, P4和P5。所有试剂盒包含不同的包装形式，4D-Nucleofector? Kits "L"含100 μl单孔电转杯，4D-Nucleofector? Kits "S"含16孔电转板条（20μl）。
试剂盒组分
- 细胞特异性核转染液
- 添加剂
- pmaxGFP阳性质粒
- 单孔电转杯（100μl）/16孔电转板条（20μl）
- 一次性吸管（与单孔电转杯配套）
产品优势
1.5种不同的原代细胞转染液（Nucleofector? Solutions）——可用于转染不同的原代细胞；
2.同时适用于4D-Nucleofector?系统和96-well Shuttle?系统；
3.转染后原代细胞可保持细胞功能。
Nucleofector 细胞核转染技术操作步骤
整个操作过程只需四步，非常简单、。
第1步：处理细胞，计数
第2步：混合DNA、转染液，重悬细胞，加入转染杯
第3步：将转染杯放入转染仪，按键选择相应程序，按"start"键开始转染，10秒钟左右
第4步：取出细胞继续培养。
人干细胞转染试剂盒（Nucleofector? Kits for Human Stem Cells）
有些人干细胞缺少细胞特异性Amaxa? Optimized Protocol，对此Lonza公司推出一系列试剂盒以方便确定Nucleofection?电转条件。P3和P4原代细胞试剂盒与细胞特异的基础Protocols一起使用，可作为人干细胞转化条件的优化，试剂盒可以用于4D-Nucleofector? System和96-well Shuttle?。另外的细胞特异性基础试剂盒适用于Nucleofector? II/2b Device，同样用于人干细胞转化条件的优化。
试剂盒优点
1）转染效率高达95%；
2）细胞活力高达98%；
3）需要更少的DNA和细胞；
4）避免了繁琐的操作
已经验证过的细胞为：H1, H9, H14, HS306
延伸阅读——原位转染
“原位核转染技术"突破了传统电穿孔技术只能在细胞悬液中转染的缺陷，实现了贴壁细胞在培养的不同阶段中直接进行转染的核转染。原位转染技术实现了生理状态下（贴壁培养过程中）的转染，如Basic Neuron Nucleofector? AD 转染试剂盒。
2010年，Lonza推出了4D系统，其中利用X unit的16孔电转板条，推出了*个原位核转染试剂盒；
2010年，Lonza推出了适用于96孔shuttle系统的新原位转染试剂盒——96孔电转板条。
2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔细胞培养板中进行原位核转染
优势：
– 可在神经元贴壁生长的任何阶段进行原位核转染或多次进行原位核转染
– 原位转染前、中、后，神经元都培养在24孔细胞培养板中，维持贴壁生长的生理状态
– *转染效率zui高可达70%的非病毒转染方法
– 整个过程维持了细胞功能
– 适用于共聚焦显微镜下观察和分析
