尼康暗场显微镜的使用方法

　  对于某些比较透明的被检物体，普通光学显微镜不能有效的观察其细节，只能通过暗场显微技术来达到观察目的。暗场显微镜技术是利用斜射照明法阻挡透过标本细节的直射光，以反射光和衍射光来观察标本。在普通显微镜下直射光透过标本的时候，一部分光被吸收，另一部分光透射或折射，形成标本细节内部结构的真实投影。因此，在普通显微镜下所看到的是物体形态和结构。普通显微镜下可以看到0.45um的细节，而暗场显微镜下竟能看到0.2-0.004um的极徽小物体。这个范围的物体叫亚粒子,因此暗场显微镜也可以称裂隙限外显微镜。而在暗场显微镜下从侧面照射到物体的光束，绕射或反射造成物体外形的侧影。因此暗场显微镜下所看到的只是物体的轮廓或物体的运动。

暗场显微镜特别适用于胶体化学领域中观察溶质粒子的布朗运动，适用于观察原虫、细菌的鞭毛、伪足运动，医学检验学范围适用于观察人体体液中螺旋体、尿管形、结晶或各种粒子.在这一点上，暗场显微镜远比其他种类显微镜要*得多。在多功能显微镜上，可以通过加装暗场附件达到组成暗场显微镜的目的，而暗场显微镜的zui关键部件是暗场聚光镜。

尼康显微镜是尼康光学仪器公司的下属品牌。尼康公司成立于 1917 年，由当时三家日本光学产品制造商合并而成，公司zui初的名字叫日本光学工业株式会社 ("日本光学")，主要进行精密光学玻璃的制造与研发。1925 年，尼康制造出了*台配有可旋转物镜转盘和可更换物镜的显微镜 – Joico 显微镜。现今，尼康已成为zui为的品牌，在光学仪器市场牢牢占据了地位，作为*一家生产自用玻璃的显微镜企业，整个生产活动为其提供了细致入微的*。凭借在光学仪器领域 90 多年持续不断的专家知识积累，加之将提高创新能力和诚信作为公司使命，尼康自始至终都站在光学和技术创新的zui前沿

暗场观察时不能使用油浸系或水浸系物镜，而用干燥系物镜中镜口率在0.85以下的物镜。假如使用镜口率过大的物镜时，除微粒子反射的光束以外的旁射光束也可进入物镜前透镜.就是这种放大率并不大的物镜下，可以达到观察亚微粒子的要求。具体操作如下：

　　1.安装暗场聚光器检查聚光器的光轴(并非晶体光轴而指几何光学光轴)是否与显微镜的光路一致。聚光镜用中心调节旋钮合轴调整之后，圈锥光束的交点集中到标本平面上。

　　2.放标本放置标本时在聚光镜前透镜与载物片之间必须浸油。否则来自标本细节的反射光和衍射光束在载物玻片表面进行全反射。观察结果趋于失败。

　　3.调节聚光镜焦点操纵光源会聚透镜务使圆锥形光束的交点照射到标本平面上。

　　4.迭择物镜用于暗场观察的物镜中.油浸系或水浸系的物镜不能使用。就是干燥系物镜中也要挑选镜率在0.85以下为好。如果物镜镜口率过大时，来自聚光镜的部分直射光束进入物镜前透镜，从而干扰暗视野成像效应。如果使用油浸系物镜观察时，必须调节物镜内装孔径光栏。

　　5.光派的选择暗场显微镜中光能损失太大。因此必须选择光强zui大的光源，才能取得较好效果。尤其以超聚光镜观察胶体微粒运动时，光强愈大愈好.

　　6.浸油的方法聚光镜与载玻片间浸油时特别注意是否有气泡。气泡可招致暗视野观察效果的*破坏。